[发明专利]细胞膜穿透肽及其作为生物活性物质传递体的用途

说明书

本发明作为涉及穿透细胞膜的新的肽的发明，是涉及肽传递体的发明，所述新的肽能够使得难以穿透真核细胞的细胞膜而传递至细胞内的物质通过多种结合向真核细胞内部传递，所述肽传递体能够使得作为在来源于人类的氨基酸序列中探索到的肽穿透细胞膜从而向细胞内有效传递多种生物活性物质。将通过探索发现的细胞膜穿透肽与蛋白质及核酸进行结合，从而确认向细胞内部传递的效能，并且确认其与现有的细胞穿透肽R9肽相比具有优秀的效能。期待通过本发明有助于利用难以向细胞内部传递从而无法被利用的多种生物活性物质的医药品、化妆品及功能性产品等的开发及利用。

技术领域

本发明涉及穿透细胞膜的新的肽(peptide)，所述新的肽能够使得难以穿透真核细胞的细胞膜而传递至细胞内的物质通过多种结合向细胞内部传递，从在蜂毒素肽(melitinpeptide)的细胞膜溶解作用中起到中枢作用的蜂毒素肽C-末端氨基酸序列，将类似的氨基酸序列从人类蛋白质的氨基酸序列中进行探索并开发。所开发的肽作为起到穿透细胞膜从而向细胞内部有效地传递多种生物活性物质的传递体的作用的肽，期待通过本发明使得难以向细胞内部传递从而无法用作有益于人类的物质且难以开发的多种生物活性物质有效地向生物体内传递，并且期待大有裨益于将其用于医药品、化妆品及功能性产品等对人类有益的产品的开发及利用。

背景技术

真核细胞的细胞膜是一种单体，其由双重脂质膜形成，对细胞内部物质进行保护，并对物质从外部流入或内部物质的移动进行控制。尤其，就类似于生物体内活性物质的核酸的亲水性物质，或类似于蛋白质、肽的尺寸较大且具有表面电荷的分子的细胞内流入而言，不是与类似于细胞膜表面的受体的特定物质的组织化且体系化的机制几乎不可能是广为人知的。因此，至今开发的药物的几乎大部分以细胞表面的物质而非细胞内部物质作为开发对象，由此如果开发出能够使得这样的亲水性物质或尺寸较大的物质有效地向细胞内部传递的传递体，则能够以尚未开发的无数的细胞内物质为对象开发有用的新药物或产品。

在细胞内部起到作用的无数的物质因缺乏或变形而无法正常发挥功能，治疗这样的疾病的最简单接近的方法是重新补充不足且变形的生物体物质。但是因为细胞膜这样的屏障，将尺寸较大的生物体分子向细胞内部传递时受到限制，由此对传递体开发的要求从很早开始就存在了，所述传递体能够向细胞内部传递物质。以此背景为基础所开发的细胞膜穿透肽是蛋白转导域(protein transduction domain；PTD)或细胞穿透肽(Cell-penetrating peptides；CPPs)。

1988年存在HIV-1(Human immunodeficiency virus，type1；人类免疫缺陷病毒1型)Tat蛋白质能够导入至哺乳类细胞的最初报告，针对将物质向细胞内部传递的传递体的研究得到了活跃地展开(文献1)。之后将肽命名为PTD或CPPs，从而开发无数的新细胞膜穿透肽，所述肽由20个左右的较短氨基酸组成，能够穿透细胞膜从而向细胞内部传递物质。作为代表性的PTD，有从HIV-1Tat蛋白质发现的Tat-PTD(文献2、3)(Tat_49-57，序列：RKKKRRQRRR)、来自于果蝇触角基因同源结构域(Antennapedia homeodomain)蛋白质的Antp(文献4)(触角足基因(Antennapedia)_43-58,序列：RQIKIWFQNRRMKWKK)、来自于HSV-1(Herpessimplexvirustype1，单纯疱疹病毒1型)VP22蛋白质的VP22(文献5)(VP22_267-300，序列：DAATATRGRSAASRPTERPRAPARSASRPRRPVE)、从人工序列开发的寡聚精氨酸(Poly-arginine)(R9，RRRRRRRRR)等，这些肽的共通的特征在于，以较高的比例构成有阳离子性氨基酸。