[发明专利]作为诊断性生物标志物的抗淋巴细胞的自身抗体

说明书

关于联邦政府资助研究的声明

本发明的作出得到由(ⅰ)国立卫生研究院授予的合同RO1AI077591，和(ⅱ)美国国防部授予的研究资助W81XWH-06-2-0038的政府支持。政府享有本发明的某些权利。

相关申请的交叉引用

本专利申请要求2014年8月8日提交的，标题为“应用抗淋巴细胞自身抗体作为系统性红斑狼疮指标的方法”的美国临时专利申请号62/035073的权益，通过引用将所述临时申请的公开内容以其全部合并入本文。

背景技术

系统性红斑狼疮(SLE)，原型自身免疫性疾病，它的特征在于无数的免疫异常，包括过量的自身抗体产生、补体系统的激活、淋巴细胞功能障碍和淋巴细胞减少。当补体系统激活时，C3和C4的蛋白水解切割最终导致C3d和C4d片段的产生，这些片段包含高反应性硫酯部分并且可以共价结合到病原体、细胞或免疫复合物的表面。本发明人最近报道了患有SLE的患者的红细胞、网织红细胞、血小板和淋巴细胞表面上特异性地存在显著水平的C4d。最近的多中心研究证实细胞结合的补体激活产物(CB-CAPs)作为狼疮的诊断性生物标志物，并且附加的报道已经证明它们作为狼疮疾病活动性和分层的生物标志物的显著潜力。

CB-CAPs除了它们作为狼疮生物标志物的作用，已经显示出赋予循环细胞例如红细胞和T淋巴细胞以功能异常，表明在狼疮发病机理中的作用。对由此产生CB-CAPs的细胞和分子事件的阐明，可以导致通过预防、破坏或中和CB-CAP产生的下游效应中的任何一种来识别潜在的治疗靶标。在CB-CAPs和狼疮发病机理之间最引起兴趣的潜在联系之一是长期存在但了解甚少的观察结果，即患有SLE的患者庇护循环抗淋巴细胞抗体。

在20世纪70年代发现了患有SLE的患者中的抗淋巴细胞抗体(ALA)，特别是对T细胞特异性的抗淋巴细胞抗体。从那时起，已经进行了很多努力来表征这些ALA。然而，它们在疾病发病机理中的作用仍然不确定。先前已经描述了SLE中抗T细胞抗体的两种主要类型。首先，在4℃时与T细胞最佳结合的冷反应性IgM抗体已被报道在患有SLE的患者中常见。然而，由于在体外试验以及体内致病分子和细胞机理之间的热差异，这些抗体的体内意义是不清楚的。第二，狼疮中的温热反应性IgG抗T细胞抗体已经被报道。已经显示这些抗体对各种T细胞表面分子，包括CD3、CD4、CD45和IL-2R，具有多样化的特异性。

这些IgM对IgG抗T细胞抗体在狼疮发病机理中的两种不同的作用已经被提出，两者都涉及细胞靶标的破坏。IgM在经典补体途径的激活中有效500倍，表明T细胞可能的溶解性攻击。然而，如果这些冷反应性IgM分子的结合仅发生在低温，将在体内消除这种可能性。此外，IgM抗T细胞抗体的存在未显示与SLE中的淋巴细胞减少相关。IgG是较低效的补体激活剂，然而它们的温热反应性使得这样的体内机理至少是可行的。抗T细胞IgG的其他潜在作用已经被提出，包括抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)以及T细胞信号传导和基因表达的调节。

一些报道已经表明狼疮中的T淋巴细胞功能障碍可能是由循环IgM和IgG抗T细胞自身抗体引发的而不是由于内在缺陷，尽管这两种可能性不是相互排斥的。总而言之，这些现有报道表明抗T细胞抗体存在于一些患有SLE的患者中，并且它们在疾病发病机理中的潜在作用的阐明应该考虑同种型、结合和细胞毒性的热幅度以及抗原特异性。

发明内容

在某些方面，提供用于在与非系统性红斑狼疮炎性疾病或病况不同的个体中特异性地诊断或监护系统性红斑狼疮的方法和系统，该方法和系统包括在来自个体的包含白血细胞的血液样本中定量在样本中的在T淋巴细胞表面上沉积的或与T淋巴细胞表面接触的个体的自身抗体的水平。

在某些方面，提供药盒，所述药盒包括：(a)特异性地识别结合至T淋巴细胞的自身抗体的荧光标记的抗体，其中所述抗体是抗IgG或抗IgM单克隆抗体；(b)可选地，与谱系特异性T淋巴细胞表面标志物反应的氟共轭单克隆抗体，以区分CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞；(c)可选地，一种或更多种生化试剂；以及，(d)可选地，所述药盒和所述组分(a)、(b)和(c)在系统性红斑狼疮的诊断中的应用的说明书。

附图简述