[发明专利]在重组宿主中生产甜菊醇糖苷

权利要求书

1.在细胞培养物中产生甜菊醇糖苷前体或甜菊醇的重组宿主，其包含：

（a）编码能够从法呢基二磷酸（FPP）和异戊烯基二磷酸（IPP）合成牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸（GGPP）的多肽的基因；

（b）编码能够从GGPP合成对映柯巴基二磷酸的多肽的基因；

（c）编码能够从对映柯巴基二磷酸合成对映贝壳杉烯的多肽的基因；

（d）编码能够还原细胞色素P450复合物的多肽的基因，所述多肽由SEQ ID NO: 22、28、69、73、74、76、87或98中任一个所示的氨基酸序列组成；

并且其还包含

（e）编码从对映贝壳杉烯合成对映贝壳杉烯酸的多肽的基因；

其中所述从对映贝壳杉烯合成对映贝壳杉烯酸的多肽为由SEQ ID NO: 54、70、71、72、75；77、78或79中任一个所示的氨基酸序列组成的多肽；

或者

（f）编码从对映贝壳杉烯酸合成甜菊醇的多肽的基因；

其中所述从对映贝壳杉烯酸合成甜菊醇的多肽为由SEQ ID NO: 68、82或91中任一个所示的氨基酸序列组成的多肽；

其中所述基因中的至少一个是重组基因；并且

其中所述重组宿主是酵母细胞。

2.权利要求1所述的重组宿主，其还包含：

（d）编码从法呢基二磷酸（FPP）和异戊烯基二磷酸（IPP）合成牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸（GGPP）的多肽的基因；

（e）编码从GGPP合成对映柯巴基二磷酸的多肽的基因；和/或

（f）编码从对映柯巴基二磷酸合成对映贝壳杉烯的多肽的基因。

3.权利要求1至2中任一项所述的重组宿主，其中：

（a）所述编码从法呢基二磷酸（FPP）和异戊烯基二磷酸（IPP）合成牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸（GGPP）的多肽的基因中，所述多肽由SEQ ID NO：49所示的氨基酸序列组成；

（b）所述编码从GGPP合成对映柯巴基二磷酸的多肽的基因中，所述多肽由SEQ ID NO：37所示的氨基酸序列组成；和/或

（c）所述编码从对映柯巴基二磷酸合成对映贝壳杉烯的多肽的基因中，所述多肽由SEQID NO：6所示氨基酸序列组成。

4.权利要求1至2中任一项所述的重组宿主，其中相对于缺乏所述重组基因的相应宿主，由所述宿主产生的对映贝壳杉烯、对映贝壳杉烯醇、对映贝壳杉烯醛和/或对映贝壳杉烯醇糖苷的量降低至少10%。

5.权利要求1至2中任一项所述的重组宿主，其中所述宿主还包含编码内质网膜多肽的基因，所述内质网膜多肽具有SEQ ID NO：114所示的氨基酸序列；其中所基因具有2个或更多个拷贝数。

6.权利要求1至2中任一项所述的重组宿主，其中所述能够从对映贝壳杉烯合成对映贝壳杉烯酸的多肽是融合构建体。

7.权利要求6所述的重组宿主，其中所述融合构建体由SEQ ID NO：118或SEQ ID NO：120所示的氨基酸序列组成。