[发明专利]使用三肽基肽酶制备醇的方法

权利要求书

1.一种用于制备醇的方法，所述方法包括：

(a)将主要具有外肽酶活性的三肽基肽酶与原料或其级分在所述原料或其级分发酵之前、期间或之后混合；以及

(b)回收醇。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述三肽基肽酶由产醇宿主表达和分泌。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述产醇宿主共表达三肽基肽酶和选自以下的酶中的一种或多种：葡糖淀粉酶、淀粉酶、另外的淀粉改性酶、蛋白酶、植酸酶、纤维素酶、半纤维素酶(例如木聚糖酶)以及它们的组合。

4.根据权利要求2或权利要求3所述的方法，其中所述三肽基肽酶对所述产醇宿主是异源的。

5.主要具有外肽酶活性的三肽基肽酶用于在醇的制造中提高醇的收率的用途。

6.主要具有外肽酶活性的一种或多种三肽基肽酶用于在醇的制造中提高产醇宿主的发酵能力的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其中通过与未和三肽基肽酶混合的所述产醇宿主在发酵期间消耗的糖(例如葡萄糖)的水平相比，所述产醇宿主在发酵期间消耗的糖(例如葡萄糖)的量的增大来评估所述产醇宿主发酵的能力。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的用途，其中将所述一种或多种三肽基肽酶与内切蛋白酶组合使用。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法或用途，其中所述三肽基肽酶为外肽酶。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法或用途，其中所述三肽基肽酶为木霉属(Trichoderma)三肽基肽酶。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法或用途，其中所述三肽基肽酶能够从在位置P1和/或P1’处具有脯氨酸的肽的N-末端切割三肽。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法或用途，其中所述三肽基肽酶能够从

在P1处具有脯氨酸；以及

在P1处具有选自丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸或合成氨基酸的氨基酸

的肽的N-末端切割三肽；和/或

能够从

在P1’处具有脯氨酸；以及

在P1’处具有选自丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸、缬氨酸或合成氨基酸的氨基酸

的肽的N-末端切割三肽。