[发明专利]亲和蛋白及其用途

权利要求书

1.亲和骨架，所述亲和骨架具有下式：

CR1-V-CR2-W-CR3-Z-CR4，

其中：

所述V、W和Z各自独立地不存在或包含一个或多个氨基酸；

所述恒定区CR1-CR4具有分别与SEQ ID NO：2、4、6和8具有至少70％同一性的氨基酸序列；和

所述亲和骨架不包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的多肽。

2.亲和骨架，所述亲和骨架具有下式：

CR1-V-CR2-W-CR5-X-CR6-Y-CR7-Z-CR4，

其中：

所述V、W、X、Y和Z各自独立地不存在或包含一个或多个氨基酸；

所述恒定区CR1、CR2、CR5、CR6、CR7和CR4具有分别与SEQ ID NO：2、4、9、11、13和8具有至少70％同一性的氨基酸序列；和

所述亲和骨架不包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列的多肽。

3. 权利要求1的亲和骨架，其中如果所述V、W和Z是分别具有SEQ ID NO：14-16的氨基酸，则所述亲和骨架将特异性结合麦芽糖结合蛋白(MBP)分子。

4. 权利要求1、2或3中任一项的亲和骨架，其中所述恒定区CR1-CR7具有分别与SEQ ID NO：2、4、6、8、9、11和13具有至少80％同一性的氨基酸序列。

5. 权利要求4的亲和骨架，其中所述恒定区CR1-CR7具有分别与SEQ ID NO：2、4、6、8、9、11和13具有至少90％同一性的氨基酸序列。

6. 权利要求5的亲和骨架，其中所述恒定区CR1-CR7具有分别与SEQ ID NO：2、4、6、8、9、11和13具有至少95％同一性的氨基酸序列。

7. 权利要求6的亲和骨架，其中所述恒定区CR1-CR7具有分别与SEQ ID NO：2、4、6、8、9、11和13具有至少99％同一性的氨基酸序列。

8.权利要求1-7中任一项的亲和骨架，其中所述恒定区CR1-CR7包含至少一个氨基酸残基置换突变，其中所述置换突变选自S815R、G834F、E849D、K860P、F882Y、L888K、E891K、K922R、M929K、M929L、M929R和/或V944R。

9.权利要求8的亲和骨架，其中所述恒定区CR3或CR7包含氨基酸置换突变M929L。

10.权利要求8的亲和骨架，其中所述恒定区CR1-CR7包含两个或更多个氨基酸残基置换突变，其中所述置换突变选自S815R、G834F、E849D、K860P、F882Y、L888K、E891K、K922R、M929K、M929L、M929R和/或V944R。

11.一种分离的cDNA序列，其在有助于表达的环境下编码权利要求1-10中任一项的亲和骨架。

12. 一种蛋白质，其包含权利要求1-10中任一项的亲和骨架，其中所述蛋白质包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。

13. 权利要求12的蛋白质，其中所述蛋白质包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列。

14. 权利要求13的蛋白质，其中所述蛋白质包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列。

15. 权利要求14的蛋白质，其中所述蛋白质包含与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少99％同一性的氨基酸序列。

16. 权利要求12-15中任一项的蛋白质，其中所述V、W、X、Y和Z中的每一个包含分别与SEQ ID NO：3、5、10、12和7的氨基酸序列具有小于100％序列同一性的氨基酸。

17. 权利要求16的蛋白质，其中所述V、W、X、Y和Z中的每一个包含分别与SEQ ID NO：3、5、10、12和7的氨基酸序列具有至多70％序列同一性的氨基酸。