[发明专利]包含PLI‑OB蛋白质变体的口服施用的组合物

说明书

技术领域

本发明涉及用于治疗用途的口服组合物的制备领域，所述口服组合物含有与感兴趣的靶标相结合的活性成分。

背景技术

有一定数量的胃肠系统疾病。为了治疗这些疾病，合意的是能够具有可用的组合物，其直接在病灶处起作用。

为了做到这一点，可以开发直肠组合物，但是口服组合物是患者所优选的，并且能够使治疗有更好的依从性。此外，并且甚至对于治疗全身性疾病(不局限于胃肠道系统)，尽可能口服施用是优先于其他施用方式(并且特别是注射)的，所述其他施用方式可能需要护理人员的参与。

无论何种疾病，通常有感兴趣的治疗靶标，药物在该靶标发挥作用。其可以是细胞受体，或微生物的表面蛋白质。通常，似乎合意的是具有组合物，所述组合物能够在作用位点直接应用活性成分，所述活性成分作用于感兴趣的治疗靶标。然而，一些蛋白质如抗体，当它们通过胃时被降解。

专利申请WO 2007/139397描述了pli-OB蛋白质的文库的用途，其中OB结构域通过在蛋白质与其天然配体结合的这个结构域中引入突变而被修饰。

专利申请WO 2008/068637描述了基于Sac7d蛋白质的文库用于获得对感兴趣的靶标具有亲和性的配体的用途。在WO 2008/068637中描述的方法包括组合文库的产生，所述组合文库含有大量均具有相同序列的DNA分子，除了存在某些导致产生野生型蛋白质变体的随机突变以外，所述变体在这种野生型pli-OB蛋白质的结合位点的某些氨基酸上表现出突变。特别地，在WO 2008/068637的情况下，野生型pli-OB蛋白质是Sac7d蛋白质，为了产生变异性，向其中引入突变，特别是在选自以下的氨基酸处：K7、Y8、K9、K21、K22、W24、V26、M29、S31、T33、T40、R42、A44、S46，或在其他氨基酸处，如V26、G27、K28、M29、S31、R42、A44、S46、E47和K48。这些氨基酸基于SEQ ID No.1所示的Sac7d序列。

专利申请WO 2012/150314公开了突变从Sac7d家族的一种蛋白质向相同家族的另一种蛋白质的可携带性(portabilité)。这种可携带性意味着从Sac7d家族的一种蛋白质的突变体构建所述家族的另一种蛋白质的突变体，这已经能够通过进行WO 2008/068637的方法特别地获得。

Sac7d家族被定义为与Sac7d家族相关的，并且相当于从嗜极细菌中分离的7kDa的DNA结合蛋白质家族。在WO 2008/068637中特别地描述了这些蛋白质和该家族。因此，在本发明的情况下，当一种蛋白质具有与序列SEQ ID No.8相对应的序列时，则所述蛋白质属于Sac7d家族。该家族特别地包含来源于嗜酸热硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)的Sac7d或Sac7e蛋白质、来源于硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobus solfataricus)的Sso7d蛋白质、来源于极端嗜热古菌(Sulfolobus tokodaii)的DBP 7蛋白质、来源于希氏硫化叶菌(Sulfolobus shibatae)的Ssh7b蛋白质、来源于希氏硫化叶菌(Sulfolobus shibatae)的Ssh7a蛋白质，和来源于硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobus solfataricus)的p7ss蛋白质。

Pli-OB蛋白质是现有技术己知的。在上面引用的文件以及Arcus(Curr Opin Struct Biol.2002十二月；12(6):794-801)中特别地描述了它们。Pli-OB是具有五个贝塔(β)片层的柱状形式。大多数pli-OB蛋白质针对其天然配体使用同样的结合界面，所述天然配体可以是寡糖、寡核苷酸、蛋白质、金属离子或催化底物。该结合界面主要包含位于β片层的残基。位于环内的某些残基也可以参与pli-OB蛋白质与其天然配体的结合。因此，专利申请WO 2007/139397和WO 2008/068637和Arcus文献(2002，如前所述)描述了用于与其天然配体结合的pli-OB蛋白质结构域。因此，专利文献WO 2008/068637详细地描述了如何鉴定pli-OB蛋白质的结合结构域。