[发明专利]高温种子萌发

权利要求书

1.生产具有经修饰的NXS基因的莴苣(Lactuca sativa)种子的方法，其中所述经修饰的NXS基因包含导致在编码根据SEQ ID No.2的蛋白质的位置140上的提前终止密码子的SNP，或者其中所述经修饰的NXS基因包含导致在编码根据SEQ ID No.2的蛋白质的位置212上的脯氨酸置换成丝氨酸的SNP，或者其中用导致非保守氨基酸改变的任何其他氨基酸置换在编码SEQ ID No.2的NXS蛋白的位置175上的色氨酸残基，当在莴苣种子中纯合存在时，所述经修饰的NXS基因为该种子提供在高温下萌发的能力，所述方法包括从具有经修饰的NXS基因的莴苣种子生长莴苣植物，允许植物产生种子并收获那些种子。

2.权利要求1的方法，其中NXS基因的表达被显著降低或被阻止。

3.权利要求1的方法，其中与不具有经修饰的NXS基因的野生型种子相比，该种子具有降低的NXS蛋白水平、降低的NXS蛋白活性或完全不存在NXS蛋白。

4.权利要求1的方法，其中提前终止密码子是SEQ ID No.1的位置3018上的GA SNP的结果。

5.权利要求1的方法，其中导致在编码根据SEQ ID No.2的蛋白质的位置212上的脯氨酸置换成丝氨酸的SNP是SEQ ID No.1的位置3518上的CT SNP。

6.权利要求1至5中任一项的方法，其中种子属于种子批次，并且所述种子包含如权利要求1至5中任一项所定义的经修饰的NXS基因，当经修饰的NXS基因纯合存在于莴苣种子中时，经修饰的NXS基因给未引发状态的种子提供在高温下萌发的能力，并且所述种子批次的特征在于所述种子批次的GT50 Dark比不包含经修饰的NXS基因的种子的种子批次的GT50Dark高至少10℃。

7.权利要求6的方法，其中包含经修饰的NXS基因的种子的种子批次的GT50 Dark比不包含经修饰的NXS基因的种子的种子批次的GT50 Dark高10℃至25℃。

8.权利要求6的方法，其中包含经修饰的NXS基因的种子的GT50Dark为至少31.8℃。

9.权利要求6的方法，其中包含经修饰的NXS基因的种子的种子批次的GT50 Dark为28℃至40℃。

10.生产能够在高温下萌发的莴苣种子的方法，包括修饰种子的NXS基因以降低基因的表达水平、以阻止基因的表达和/或降低编码的NXS蛋白的活性，其中修饰NXS基因包括引入导致在编码根据SEQ ID No.2的蛋白质的位置140上的提前终止密码子的SNP，或者引入导致在编码根据SEQ ID No.2的蛋白质的位置212上的脯氨酸置换成丝氨酸的SNP，或者用导致非保守氨基酸改变的任何其他氨基酸置换在编码SEQ ID No.2的NXS蛋白的位置175上的色氨酸残基。

11.生产具有如权利要求1至5中任一项所定义的经修饰的NXS基因的莴苣植物的方法，其中当在莴苣种子中纯合存在时，所述经修饰的NXS基因为种子提供在高温下萌发的能力，所述方法通过使用二倍体化单倍体生成技术以产生包含高温萌发性状的二倍体化单倍体系。

12.生产杂交莴苣种子的方法，包括将第一亲本莴苣植物与第二亲本莴苣植物杂交并收获所得杂交种子，其中所述第一亲本植物和所述第二亲本植物是携带如权利要求1至5中任一项所定义的经修饰的NXS基因的至少一个等位基因的植物，其中所述经修饰的NXS基因包含导致在编码根据SEQ ID No.2的蛋白质的位置140上的提前终止密码子的SNP，或者其中所述经修饰的NXS基因包含导致在编码根据SEQ ID No.2的蛋白质的位置212上的脯氨酸置换成丝氨酸的SNP，或者其中用导致非保守氨基酸改变的任何其他氨基酸置换在编码SEQID No.2的NXS蛋白的位置175上的色氨酸残基。