[发明专利]用于稳定反式剪接的内含肽修饰的蛋白酶的方法和组合物

权利要求书

1.一种内含肽修饰的蛋白酶，该内含肽修饰的蛋白酶包括：第一前体和第二前体：所述第一前体包括与反式剪接的内含肽的可溶性增强的N-内含肽融合的靶蛋白酶的N-外显肽，且N-外显肽的羧基末端与可溶性增强的N-内含肽的氨基末端融合；所述第二前体包括与靶蛋白酶的C-外显肽融合的反式剪接的内含肽的可溶性增强的C-内含肽，且可溶性增强的C-内含肽的羧基末端与C-外显肽的氨基末端融合；且在反式剪接之前所述第一前体与所述第二前体是分离的；其中，所述第一前体的氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，且所述第二前体的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示，所述内含肽修饰的蛋白酶与所述靶蛋白酶相比具有增强的可溶性和降低的活性，且经所述内含肽修饰的蛋白酶的反式剪接以及N-外显肽与C-外显肽的融合，所述靶蛋白酶的活性恢复。

2.一种表达盒，该表达盒包括编码内含肽修饰的蛋白酶的第一前体或第二前体的多核苷酸，

其中，所述第一前体包括与反式剪接的内含肽的可溶性增强的N-内含肽融合的靶蛋白酶的N-外显肽，且N-外显肽的羧基末端与可溶性增强的N-内含肽的氨基末端融合；所述第二前体包括与靶蛋白酶的C-外显肽融合的反式剪接的内含肽的可溶性增强的C-内含肽，且可溶性增强的C-内含肽的羧基末端与C-外显肽的氨基末端融合；并且

其中，所述多核苷酸的序列为SEQ ID NO：3或4所示，经所述表达盒的表达，在反式剪接之前所述第一前体与所述第二前体将是分离的，内含肽修饰的蛋白酶与靶蛋白酶相比将具有增强的可溶性和降低的活性，且经内含肽修饰的蛋白酶的反式剪接以及N-外显肽与C-外显肽的融合，靶蛋白酶的活性将恢复。

3.一种组合物，该组合物含有：内含肽修饰的蛋白酶的第一前体和内含肽修饰的蛋白酶的第二前体，所述第一前体包括与反式剪接的内含肽的可溶性增强的N-内含肽融合的靶蛋白酶的N-外显肽，且N-外显肽的羧基末端与可溶性增强的N-内含肽的氨基末端融合；所述第二前体包括与靶蛋白酶的C-外显肽融合的反式剪接的内含肽的可溶性增强的C-内含肽，且可溶性增强的C-内含肽的羧基末端与C-外显肽的氨基末端融合；且在反式剪接之前所述第一前体与所述第二前体是分离的；其中，所述第一前体的氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，且所述第二前体的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示，内含肽修饰的蛋白酶与靶蛋白酶相比具有增强的可溶性和降低的活性，且经内含肽修饰的蛋白酶的反式剪接以及N-外显肽与C-外显肽的融合，靶蛋白酶获得活性。

4.一种家庭护理产品，该家庭护理产品含有权利要求1所述的内含肽修饰的蛋白酶、或权利要求3所述的组合物、以及选自由：钠盐补充剂、钾盐补充剂、铵盐补充剂、带电聚合盐补充剂、多元醇补充剂、柠檬酸锂和乙氧基化醇醚组成的组中的一种或多种效应物。

5.根据权利要求4所述的家庭护理产品，其中，所述一种或多种效应物能够抑制反式剪接。

6.根据权利要求5所述的家庭护理产品，其中，所述抑制是可逆的。

7.根据权利要求4所述的家庭护理产品，其中，所述钠盐补充剂选自由：氯化钠、亚氨基二琥珀酸四钠、琥珀酸二钠、酒石酸二钠、烟酸钠和聚天冬氨酸钠组成的组。

8.根据权利要求4所述的家庭护理产品，其中，所述钾盐补充剂选自由：乳酸钾、柠檬酸钾和氯化钾组成的组。

9.根据权利要求4所述的家庭护理产品，其中，所述铵盐补充剂选自由：硫酸铵和硝酸铵组成的组。

10.根据权利要求4所述的家庭护理产品，其中，所述多元醇补充剂选自由：四乙二醇、聚乙二醇、四甘醇、碳酸丙烯酯、单丙二醇和甘油组成的组。

11.根据权利要求4所述的家庭护理产品，其中，所述家庭护理产品进一步含有洗涤剂。