[发明专利]其中未分化细胞被去除的分化诱导的细胞群、其用途及其制备方法

说明书

本发明提供了包含通过诱导多能干细胞分化获得的分化细胞的细胞群，其中未分化多能干细胞的含量比例为0.2％以下。

技术领域

本发明涉及其中未分化细胞被去除的分化诱导的细胞群、其用途及其制备方法。

背景技术

已经对包含通过诱导多能干细胞分化而获得的分化细胞的细胞群积极地进行了研究和开发。这种细胞群(多能干细胞加工产品)作为药物(细胞药物)或作为药物设计、开发等研究工具的有用性引起了人们的关注。根据目的，多能干细胞，如iPS细胞，被广泛使用。

然而，在这些分化诱导的细胞群中，未分化状态的多能干细胞不可避免地保留并被掺入。这是有问题的，因为无论旨在何种目的，分化诱导的细胞的纯度优选较高。特别地，当使用在未分化状态的具有致瘤性的多能干细胞时，如果分化诱导的细胞群含有未分化的多能干细胞，则使用分化诱导的细胞群作为药物具有安全风险。

因此，已经提出了用于进一步提高分化诱导的细胞群的纯度的各种技术。这些技术大致分为两组：主要提高分化诱导效率的技术组，以及纯化和精制分化诱导的细胞的技术组。后一组进一步分为两组：选择性地分离分化诱导的细胞(阳性选择)的技术，以及去除不可避免地混有的未分化多能干细胞(阴性选择)的技术。用于纯化和精制分化诱导的细胞的技术可以依据如下方法的差异进行分类。例如，作为使用特定培养基的方法，NPL 1和NPL2提出了使用蛋氨酸(-)培养基的方法，NPL 3和NPL 4提出了使用无糖培养基的方法。另外，作为使用存活信号抑制剂的方法，NPL 5提出了使用存活蛋白抑制剂的方法。此外，作为使用FACS分选的方法，NPL 6提出了通过抗SSEA-5抗体进行清洗，NPL7提出使用糖链抗体(凝集素)进行清洗。

引用列表

非专利文献

NPL1:Matsuura K,Kodama F,Sugiyama K,Shimizu T,Hagiwara N,OkanoT.Elimination of remaining undifferentiated iPS cells in the process of humancardiac cell sheet fabrication using a methionine-free culture condition(在使用不含蛋氨酸的培养条件的人心脏细胞片层制造过程中除去剩余的未分化的iPS细胞).Tissue Eng Part C Methods.2014年9月23日.(印刷前的Epub文件)

NPL 2:Shiraki N,Shiraki Y,Tsuyama T,Obata F,Miura M,Nagae G,AburataniH,Kume K,Endo F,Kume S.Methionine metabolism regulates maintenance anddifferentiation of human pluripotent stem cells(甲硫氨酸代谢调节人多能干细胞的维持和分化).Cell Metab.2014年5月6日；19(5):780-94.

NPL 3:Tohyama S,Hattori F,Sano M,Hishiki T,Nagahata Y,Matsuura T,Hashimoto H,Suzuki T,Yamashita H,Satoh Y,Egashira T,Seki T,Muraoka N,YamakawaH,Ohgino Y,Tanaka T,Yoichi M,Yuasa S,Murata M,Suematsu M,Fukuda K.Distinctmetabolic flow enables large-scale purification of mouse and humanpluripotent stem cell-derived cardiomyocytes(不同的代谢流量可以大规模纯化小鼠和人多能干细胞来源的心肌细胞).Cell Stem Cell.2013年1月3日；12(1):127-37.