[发明专利]可溶内含肽融合蛋白以及用于纯化生物分子的方法

权利要求书

1.一种可溶融合蛋白，包括由肽键连接的N-内含肽多肽和N-内含肽溶解配偶体，所述N-内含肽多肽能够通过与包括C-内含肽多肽的融合蛋白相缔合来形成有活性的内含肽复合体，其中所述N-内含肽多肽包括选自SEQ ID NO:1-8，29-35和42-53的氨基酸序列，所述C-内含肽多肽包括选自SEQ ID NO:9-10，36-41和54-60的氨基酸序列，所述N-内含肽溶解配偶体选自溶解配偶体46、206和246中的至少一种，并且所述N-内含肽多肽共价附接至固体支持物；

其中所述溶解配偶体46的氨基酸序列为：

MREYPNGEKTHLTVMAAGFPSLTGDHKVIYVAADRHVTSEEILEAAIRLLS

所述溶解配偶体206的氨基酸序列为：

MSHLDEVIARVDAAIEESVIAHMNELLIALSDDAELSREDRYTQQQRLRTAIAHHGRKHKEDMEARHEQLTKGGTIL

所述溶解配偶体246的氨基酸序列为：

MNKETQPIDRETLLKEANKIIREHEDTLAGIEATGVTQRNGVLVFTGDYFLDEQGLPTAKSTAVFNMFKHLAHVLSEKYHLVD。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中该N-内含肽多肽是氨基酸序列SEQ ID NO:1的GP41-1 N-内含肽、或GP41-1 N-内含肽的变体，该GP41-1 N-内含肽的变体为选自由氨基酸序列SEQ ID NO:2的GP41-1 NINTΔA_CC N-内含肽变体、氨基酸序列SEQ ID NO:3的GP41-1NINTΔA_AC N-内含肽变体、氨基酸序列SEQ ID NO:4的GP41-1NINTΔA_CK N-内含肽变体、氨基酸序列SEQ ID NO:5的GP41-1 NINTΔA_AM N-内含肽变体、氨基酸序列SEQ ID NO:6的GP41-1 NINTΔA_TM N-内含肽变体、氨基酸序列SEQ ID NO:7的GP41-1 NINTΔA_AK N-内含肽变体、氨基酸序列SEQ ID NO:8的GP41-1 NINTΔA_TK N-内含肽变体、氨基酸序列SEQID NO:9的GP41-1 C-内含肽或氨基酸序列SEQ ID NO:10的GP41-1 C-内含肽-硫氧还蛋白融合蛋白组成的组中的一种。

3.如权利要求1所述的融合蛋白，其中该N-内含肽多肽缺少用于将该融合蛋白附接至固体支持物的氨基酸。

4.如权利要求3所述的融合蛋白，其中用于将该融合蛋白附接至固体支持物的氨基酸是半胱氨酸。

5.如权利要求1-4中任一项所述的融合蛋白，其中N-内含肽溶解配偶体被连接至该N-内含肽多肽的N末端。

6.如权利要求1-4中任一项所述的融合蛋白，其中N-内含肽溶解配偶体被连接至该N-内含肽多肽的C末端。

7.如权利要求1所述的融合蛋白，其中在按质量计小于25％的所产生的融合蛋白存在于包涵体中的条件下，该融合蛋白在大肠杆菌中产生。

8.如权利要求1所述的融合蛋白，其中修饰该融合蛋白以包括一个可检测标签。

9.如权利要求8所述的融合蛋白，其中该可检测标签是荧光染料。

10.如权利要求1所述的融合蛋白，其中该融合蛋白在大肠杆菌中进行表达。

11.一种编码如权利要求1-10所述的融合蛋白的核酸。

12.如权利要求11所述的核酸，其中该核酸包括在表达载体中。

13.如权利要求11所述的核酸，其中该核酸包括在质粒中。