[发明专利]海藻糖在细胞混悬液中的用途

说明书

相关申请的引用

本申请要求在2014年9月29日提交的美国临时专利申请No.62/056,842的权益，其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本公开的各方面大体涉及细胞组合物，并且特别地涉及用于稀释或混悬先前经历低温贮藏的细胞的液体组合物。

背景技术

在各种病理学或疾病的治疗中向人和动物施用细胞组合物已经变得越来越普遍，并且有希望改善许多疗法。由于被施用至患者，细胞组合物的性质是重要的。组合物的添加剂对于患者必须是生物学上可接受的。同样地，组合物中的细胞的状态，以及在施用方案之前、之中和之后的细胞的活力，也是非常重要的。

在一个值得关注的方面中，混悬在液体介质中的细胞往往趋向于聚集(aggregate)或凝集(clump)。在细胞已被低温贮藏然后解冻后的一些情况中，已经观察到凝集是一个特别的问题。这可以破坏恢复、保持和递送高治疗剂量的细胞的尝试。同样地，高度凝集的细胞制剂的施用可以对患者构成风险，这可以通过有效的方式改善，以使细胞凝集最小化或减少。

鉴于该领域的背景技术，仍然需要用于制备细胞混悬液组合物的改进的和/或替代的方法和组合物，例如其适于递送至人或动物患者。本公开的各方面即是针对这些需求。

发明内容

在本文公开的某些方面中，已经发现含有海藻糖(trehalose)的含水介质连同细胞混悬液的制剂，优选哺乳动物细胞混悬液的制剂，具有有利的用途。已经发现海藻糖有利地抑制细胞凝集，允许制备用于治疗或其他用途的改进的细胞混悬液。细胞可以为先前经历低温贮藏和解冻的细胞。可以将解冻的细胞与含有海藻糖的含水介质组合，以制备细胞混悬液。

根据本文公开的一个实施方案，用于制备细胞混悬液的方法包括步骤：(i)将低温贮藏的细胞解冻，以提供解冻的细胞；和(ii)将解冻的细胞与含有海藻糖的含水介质组合。在优选的实施方案中，组合步骤包括将解冻的细胞，由第一、较高的细胞每毫升(细胞/mL)密度稀释至第二、较低的细胞/mL密度。例如，稀释可以引起以细胞/mL计的密度降低至少30％，或以细胞/mL计的密度降低至少50％。此外或可替代地，稀释可以为由大于3百万个细胞/mL的第一密度至小于两百五十万个细胞/mL的第二密度，例如在约250,000至约2,500,000个细胞/mL的范围内。

根据本文公开的其他实施方案，提供用于制备含有海藻糖的细胞混悬液的液体组合物。所述液体组合物包含无菌含水介质，所述介质含有在以重量计约0.5％至约20％，更优选以重量计约0.5％至约10％的范围内的浓度的海藻糖，和/或具有在约200至约600的范围内的同渗容摩(osmolarity)。所述组合物可以包含约0.9％氯化钠，并且还有利地被缓冲，例如用磷酸盐缓冲液缓冲，并且具有约6至约8的pH。

根据本文公开的另外的实施方案，提供用于制备细胞混悬液的试剂盒，其包含如上面和本文其他地方所描述的液体海藻糖组合物，以及用于将液体海藻糖组合物与细胞组合的容器，例如袋。所述试剂盒还可以包含含有将与液体海藻糖组合物组合的细胞的容器(例如小瓶或袋)和/或在将细胞混悬液施用至患者之前可以使制备的细胞混悬液通过的过滤器。

另外的实施方案，以及其特征和优势将在本文的描述中变得显而易见。

详细描述

在该详细描述中将引用某些实施方案，并且将使用特定语言来描述实施方案。将理解，该描述旨在为说明性的。预期所描述的实施方案中的任何改变和进一步的修饰，及其原理的任何进一步的应用，为本公开所属技术领域的技术人员通常会想到的。

如上面所公开，在某些方面，本公开涉及用于制备含有海藻糖的细胞混悬液的方法，及可用于该方法的组合物和试剂盒。

海藻糖(trehalose)也被称为海藻糖(mycose)或海藻糖(tremalose)，是由两个α-葡萄糖单元之间的α,α-1,1-葡萄糖苷键形成的α连接的二糖。其化学名为(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(羟基甲基)-6-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟基甲基)环氧己烷-2-基]氧基环氧己烷-3,4,5-三醇(IUPAC命名法)。