[发明专利]改进的HVT作为载体的ND-IBD疫苗

说明书

本发明涉及针对目标动物的新的和改进的HVT作为载体的ND‑IBD疫苗，其含有包含来自IBDV的VP2基因和来自NDV的F基因的重组HVT。重组HVT可用于家禽疫苗中，所述家禽疫苗相对于现有技术构建体展现NDV F‑和IBDV VP2基因的良好的病毒载体复制、有效表达，针对ND和IBD的改进的免疫保护以及改善的遗传稳定性。

本发明涉及兽医疫苗、即基于重组火鸡疱疹病毒(HVT)作为病毒载体的针对ND和IBD的家禽疫苗的领域。具体而言，本发明涉及重组DNA表达盒，包含重组DNA表达盒的重组HVT，基于重组HVT或包含重组HVT的宿主细胞的家禽疫苗。此外，本发明涉及表达盒、重组HVT和宿主细胞用于疫苗的制备和使用的方法和用途。

马立克氏病(MD)是世界范围内发生的高度传染性的家禽疾病，并且其特征在于在几种器官和神经中存在T细胞淋巴瘤。这导致各种症状，尤其是麻痹和死亡。新生雏鸡可以被来自免疫母体的母体来源的抗体(MDA)保护。MD由马立克氏病病毒(MDV)引起，所述马立克氏病病毒(MDV)属于α疱疹病毒亚科和马立克病毒属。病毒粒子是有包膜的，并且大小约160 nm。在衣壳内包含大小为100和200 kbp之间的线性双链DNA的大基因组。

存在不同血清型的MDV，其各自具有不同的特征。尽管MDV血清型1(MDV1)和MDV2对家禽致病，但MDV3没有。MDV3更通常被称为：Meleagrid疱疹病毒1，火鸡疱疹病毒，但通常为：火鸡疱疹病毒(HVT)。HVT在1970年被描述为对鸡不致病(apathogenic)的火鸡疱疹病毒(Witter等人, 1970, Am. J. Vet. Res., vol. 31, p. 525)。自那时起HVT毒株例如PB1或FC-126已通常用于针对由MDV1或MDV2引起的MD接种鸡。并且在需要针对毒力更强的MDV1变体的保护的情况下，HVT与MDV2疫苗毒株例如SB1组合使用，如在Nobilis™ MarexineCA126+SB1 (MSD Animal Health)中，或与减毒MDV1疫苗毒株例如Rispens组合，例如在Nobilis™ RISMAVAC+CA126 (MSD Animal Health)中。

HVT在鸟类的外周血淋巴细胞(PBL)中复制，并且因此是诱导主要针对细胞免疫系统的长持续时间的免疫反应的全身性病毒。

HVT疫苗作为冷冻的HVT感染的细胞市售，并且可以在早期应用于鸡，因为它们对于针对HVT的抗体相对不敏感(例如MDA中)。因为新出生的雏鸡从其第一天起面临MDV的感染压力，因此HVT疫苗尽可能早地(例如在其从蛋中孵化的当天(第一天)，或甚至在孵化前仍在蛋中时)接种到雏鸡内。该后一种方法，所谓的‘卵内接种(in ovo vaccination)’，是胚胎接种的形式，其通常在胚胎发育(ED)的第18天(在孵化前约3天)应用。

除了用作疫苗本身之外，HVT还被用作用于将各种免疫原性蛋白表达和递送给家禽的病毒载体疫苗，参见例如，WO 87/04463。通常，表达的基因编码对需要针对其接种的家禽致病的微生物的保护性抗原(的一部分)。多年来，许多异源基因已经在HVT载体中表达，例如来自：新城疫病毒(NDV) (Sondermeijer等人, 1993, Vaccine, vol. 11, p. 349-358)、传染性法氏囊病病毒(IBDV) (Darteil等人, 1995, Virology, vol. 211, p. 481-490)和寄生虫抗原(Cronenberg等人, 1999, Acta Virol., vol. 43, p. 192-197)。

HVT载体疫苗向家禽的施用因此生成针对所表达的异源基因、以及针对HVT(其针对MD进行保护)的免疫反应。这应用于多种商业HVT载体疫苗产品中，例如：NDV F蛋白基因：Innovax™-ND(MSD Animal Health)，和Vectormune™ HVT-NDV(Ceva)；或IBDV VP2基因：Vaxxitek™ HVT+IBD(Merial；先前命名为：Gallivac™ HVT-IBD)、和Vectormune™ HVT-IBD(Ceva)。