[发明专利]多层复合物、制造所述复合物的方法和所述复合物的用途

说明书

本发明涉及三层复合物，其包含至少一种磁性化合物、至少一种无机硅酸盐、以及对所述至少一种磁性化合物和/或所述至少一种无机硅酸盐具有亲和力的至少一种化合物。

技术领域

本发明涉及分子诊断领域。更具体而言，本发明涉及允许从生物样品或环境标本中提取和/或纯化核酸(DNA和/或RNA)的固体磁性复合物，这些复合物具有至少三个不同的层。

背景技术

分子生物学的快速发展已使得能够在诊断方面取得巨大进步。因此，从测试样品开始，能够提取和检测属于宿主的核酸或样品中包含的感染性微生物。这种遗传材料的检测或甚至定量使得能够建立关于微生物感染或癌基因存在的诊断。这一般在下述三个步骤中进行：

1)从复杂的生物样品(血液、肿瘤、食物等)中提取核酸，其由细胞的化学或机械裂解组成，以释放内容物且特别是其中的核酸。后者被选择性纯化，以便如果其量不足以用于直接检测，则进行扩增。

2)通过遗传材料扩增技术扩增纯化的核酸：NASBA、RT PCR、PCR等。当从生物样品中收集的核酸量非常低或当测试对于直接检测不够敏感时，需要这个步骤。

3)通过称为终点、实时、通过测序等技术来检测扩增的核酸。根据所使用的检测技术，这个步骤可以允许寻求的靶核酸的选择性定量。

对于核酸的灵敏性和特异性检测，并且因此用于进行最正确的可能诊断，看起来需要从细胞中有效提取和/或分离核酸(DNA和RNA)。这个提取和/或纯化步骤，也称为“样品制备”(用于样品制备)一般是关键的，因为导致诊断测试的最终结果的一系列事件的所有质量将跟着这个第一步骤发生。实际上，需要具有尽可能特异性和有效(在量、纯度和时间方面)的核酸提取，以免丢失信息，这可以导致错误诊断并且对于患者是致命的。

已开发了许多技术来尝试从各种生物样品中提取核酸。最古老的方法使用一般由下述组成的多个步骤：富集含有核酸的细胞，裂解这些细胞，分离和去除蛋白质、膜和其他细胞组成成分，以及通过从有机溶剂沉淀来纯化剩余的核酸。这些技术是昂贵的，需要大量的时间，并且通常是不可能自动化的。因此，它们不再适合于其中需要自动化的目前实践，因为它使得能够尽可能快地获得结果，并且避免污染和人为错误的问题，特别是在其中患者的重要预后冒风险的败血症(“血液感染”)的情况下。最新的核酸提取技术使用固相，其中细胞在特定反应条件下裂解，并且释放的核酸与固相结合。现有技术中众所周知的是目前的核酸提取技术常常使用固相，其是二氧化硅涂布的颗粒。这是因为二氧化硅具有在某些盐浓度和pH条件下可逆吸附核酸的性质，这使得其成为非常适合于此目的的材料。这些技术在“Rapid and simple method for purification of nucleic acids.”,Boom,Journal of Clinical Microbiology,1990第495页和专利US 5 234809中被同一作者明确地描述。