[发明专利]重组猪痘病毒和疫苗

说明书

本发明涉及新的重组猪痘病毒和其在疫苗组合物中的用途。本发明的重组猪痘病毒通过将一个或多个外源基因插入猪痘病毒的IL‑18结合蛋白(IL18bp)基因中产生。本发明特别适合于产生猪疫苗，特别是用于接种猪对抗PCV2感染。

本发明涉及新的重组猪痘病毒和其在疫苗组合物中的用途。本发明的重组猪痘病毒通过将一个或多个外源基因插入猪痘病毒的IL-18结合蛋白(IL18bp)基因中产生。本发明特别适合于产生猪疫苗，特别是用于接种猪对抗PCV2感染。

背景技术

不同类型的病毒已经在本领域中提议作为用于基因递送或体内肽表达的载体。特别地，已经使用重组病毒例如痘病毒(Ogawa R.等人, Vaccine, 8:486-490 (1990))、腺病毒(HSU, K. H.等人, Vaccine, 12; 607-612 (1994))、杆状病毒以及疱疹病毒(Shin, M.-F.等人, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81:5867-5870 (1984))制备了表达至少一种有关抗原的兽医疫苗。允许表达外源抗原的基因的具体病毒载体的实例包括Aujeszky病病毒(伪狂犬病病毒; PRV) (Van Zijl M.等人, J. Virol., 65:2761-2765 (1991))、火鸡疱疹病毒(HVT) (Morgan R. W.等人, Avian Dis. 36:858-870 (1992))和Marek病病毒(MDV)。基于疱疹病毒属的重组载体处于深入研究中。

然而，本领域存在对可用于体内表达重组肽或蛋白的新病毒载体产品的需求。在此方面，痘病毒已经经工程改造以编码不同的多肽。一旦从感染的细胞释放入血液，痘病毒可感染其它细胞，因此潜在地导致升高的表达水平。重组痘病毒已经从不同类型的痘病毒产生，包括牛痘病毒、痘苗病毒和猪痘病毒(SPV)。然而，迄今为止，SPV重组体基本上通过将外源基因序列克隆入被认为对SPV存活非必需的基因区域即TK区域来产生(Richard W.Moyer, Eladio Vinuela, E. P. J. Gibbs, US5,651,972 (1997))。

本发明的发明人目前已经发现和验证了一个新的SPV基因插入区域，可将各种各样的外源基因序列插入其中。所得的重组SPV病毒允许有效和稳定表达克隆的基因序列，并且具有大克隆容量。此外，这些病毒在体内具有提高的免疫原性，并且可用于产生用于治疗任何哺乳动物特别是猪的治疗剂或疫苗。

发明概述

本发明涉及新的重组猪痘病毒及其用于基因递送和体内表达的用途，特别是在疫苗组合物中。本发明的重组猪痘病毒在猪痘病毒的IL-18结合蛋白(IL18bp)基因中包含一个或多个外源基因序列。本发明特别适合产生猪疫苗，特别是用于接种猪对抗PCV2感染。

本发明的第一个目的因此涉及在其基因组中包含至少一个第一外源基因序列的重组猪痘病毒(rSPV)，其中所述第一外源基因序列插入rSPV基因组的IL18bp基因中。在一个具体的实施方案中，将外源基因序列插入置换所有或部分的病毒IL18bp基因序列。在另一个具体的实施方案中，本发明的rSPV进一步包含至少第二外源基因序列插入rSPV基因组的不同区域中，例如病毒胸苷激酶(TK)基因或锚蛋白重复序列(Ankyrin repeat)蛋白基因中。

本发明的另一个目的在于包含如上所定义的rSPV的基因组的核酸分子。

本发明的另一个目的为包含本发明的rSPV或核酸分子的宿主细胞。

本发明进一步提供用于产生rSPV的方法，包括感染或引入感受态细胞中如上所定义的核酸分子和收集rSPV。

本发明还涉及用于繁殖rSPV的方法，包括感染感受态细胞如上所定义的rSPV和收集所述细胞产生的rSPV。

本发明还涉及一种组合物，优选地兽医组合物，其包含如上所定义的rSPV或如上所定义的细胞或如上所定义的核酸分子以及赋形剂。