[发明专利]对多种食物抗原的IgG和IgA抗体和C1Q食物蛋白免疫复合物的同时表征

说明书

已经研发了用于精确地表征对食物过敏原的免疫反应性的组合物和方法，其中提供了测试表面，其将源自相同食物的不同食物抗原制品并入单独测试位点。这样涂覆的表面可以使用未加工的和烹饪的食物产生。使用一组这样的测试表面来表征特异性的IgG、IgA和/或C1q结合在测定对特定食物的免疫反应性和应答中提供了改进的灵敏度和精确性。

技术领域

本发明的领域是对食物过敏的分析，具体而言是对食物抗原的延迟的超敏反应。

背景技术

下面的描述包括在理解本发明中可能有用的信息。这不是承认本文提供的任何信息是现有技术或者与本要求保护的发明相关，或者明确或隐含引用的任何出版物是现有技术。

包括神经自身免疫性疾病在内的自身免疫性紊乱影响7-10％的世界人口。越来越多地，这些紊乱变得与通常消费食物的免疫反应性相关联。通常地，肠粘膜免疫系统通过对在膳食蛋白质和肽中发现的抗原以及共生菌诱导耐受性同时针对病原体运用免疫防御来维持免疫稳态。但是，“友好的”抗原物质的身体的正常耐受性可以被许多因素破坏。肠道屏障功能紊乱和与肠相关的屏障的破坏可以允许未消化的蛋白和肽进入循环。在这些情况下，这些食品物质的摄入可以导致IgG和IgA抗体的产生，其不仅针对各种食物抗原而且针对身体的自身组织(称为食物自身免疫反应性的现象)。这是由于在许多通常消费食物的氨基酸序列与在包括神经细胞在内的人组织中天然存在的许多蛋白质的氨基酸序列之间的同源性(其以不同程度存在)。作为在这些各种食物蛋白和不同靶组织抗原之间的这种抗原相似性或分子模拟的结果，未能检测食物免疫反应性可以最初导致自身免疫反应性的发展并可能导致自身免疫性(例如神经自身免疫性)疾病(Vojdani,2014a；Vojdani,2014b)。结果，食物免疫反应性受到越来越多的关注，这是由于它们增加的患病率和它们对健康和生活质量的副作用二者(Johnson等，2014；Vojdani等，2014c)。

本文指出的所有出版物通过引用被并入，其程度如同每个单独的出版物或专利申请具体地或单独地被指示通过引用并入。在并入的参考文献中的术语的限定或用途与本文提供的那个术语的限定不一致或相反的情况下，应用本文提供的那个术语的限定并且不应用参考文献中那个术语的限定。

免疫反应性的机制通常是双相的：急性反应在过敏原暴露之后立刻发生，然后是几个小时之后的晚期反应。在急性反应期间，由于IgE和/或IgG结合至各种细胞和介质——比如组胺和血小板活化因子(PAF)——由肥大细胞、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞的释放，症状发生。晚期涉及炎性细胞因子——比如IL-4、IL-9、IL-33和TNF-α——和细胞——比如中性粒细胞和嗜酸性粒细胞——的流入(Ho等，2012)。在经典的延迟型食物免疫反应性中，针对各种食物抗原的高水平IgG、IgM或IgA的产生导致C1q结合至抗体，伴随在各种组织部位中形成免疫复合物和沉积免疫复合物。在对这些食物抗原的初始免疫反应之后，症状可以继续数天或甚至数周。

IgE、IgG、IgA或IgM在食物免疫反应性中起到各种作用(Mijayima等，1997)。IgE经由在肥大细胞和嗜碱性粒细胞上高度表达的其高亲和力受体FcεRI起作用。IgG具有数种受体，其包括高亲和力FcγRI和FcγRIV受体以及低亲和力FcγRIIB和FcγRIII受体。所有这些受体在涉及过敏反应的数种类型的细胞上表达，所述细胞包括肥大细胞、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞和巨噬细胞。

在食物免疫反应性中涉及五种不同的途径(Mancardi等，2013；Smit等，2011；Strait等，2002)：

1.经典途径–包括IgE和其受体FcεRI、肥大细胞和组胺

2.旁路途径–由IgG1、FcγRIII、巨噬细胞和PAF途径介导

3.IgG-嗜碱性粒细胞-PAF途径

4.经由FcγRIV的IgG-中性粒细胞-PAF途径

5.IgG、IgM或IgA-免疫复合物中性粒细胞途径。