[发明专利]一种医药组合物用于制备促进软骨细胞生成的药物的用途

说明书

本发明系关于一种医药组合物用于制备促进软骨细胞生成的药物的用途，其中该医药组合物包含一玻尿酸混合物及一他汀（statin）类化合物。

技术领域

本发明是关于一种医药组合物用于制备促进软骨细胞生成的药物的用途，特别是用包含玻尿酸及辛伐他汀的医药组合物以促进软骨细胞生成。

背景技术

软骨组织是一种无血管、淋巴系统以及神经的结缔组织，主要为透明软骨（Hyaline Cartilage），而透明软骨主要是由软骨细胞、第二型胶原蛋白（type IIcollagen）、蛋白聚糖（proteoglycan）组成。一旦软骨组织受损，由于邻近软骨细胞的数目非常有限，不足以修复损伤，更何况还有受限于细胞外基质的包覆，难以迁移到受伤的部位的问题。目前已知的是，软骨自我修复所生成的新组织大多为纤维性软骨（fibrocartilage）组织，其主要是为第一型胶原蛋白（type I collagen）。由于纤维性软骨组织缺乏与软骨应有的生物力学特性且又无透明软骨的功能，因此会逐渐降解（degradation），难以使关节恢复到伤害前的正常运动状态。近年来，利用组织工程进行软骨组织修复的发展相当快速，此方式是利用软骨细胞或间质干细胞制造出具有活性及功能的关节软骨组织，使用间质干细胞做为细胞来源是目前公认较具潜力的方式，虽然间质干细胞具有可分化成软骨细胞的功能，但若要应用于关节软骨组织的修复，则需要使用诱导因子将间质干细胞诱导软骨分化，然而使用蛋白质类的诱导因子，价格昂贵、蛋白质变性或是携带病原体的问题。使用化学类的诱导因子，则有引起其它副作用的问题。骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein-2，BMP-2）过去已经被报告可以诱导干细胞软骨化及诱导骨母细胞骨化，因此可以应用在关节软骨及骨组织工程。但是诱导BMP-2表达，用以修复关节软骨，也会有硬骨化的疑虑，在过去以干细胞大量表达BMP-2治疗软骨缺损的研究也发现虽然可以修复软骨缺损处，但修复处也发生骨刺生成的问题（Arthritis Rheum.Articular cartilage repair by gene therapy using growth factor-producingmesenchymal cells. 2003 Feb;48(2):430-41.）。但如何帮助干细胞大量表达BMP-2来修复软骨缺损处，同时避免BMP-2所造成的骨化是目前仍未解决的问题。

他汀（Statin）类的临床药物，包含辛伐他汀（simvastatin），主要在临床上是应用于降低血脂。此外也可以诱导软骨细胞表达BMP-2，软骨化基因（Collagen type II Aggrecan）及软骨细胞外间质的合成。但他汀类的药物也可以诱导骨母细胞表达BMP-2来帮助骨化进行骨折修复。因此使用他汀的药物，虽然可以诱发BMP-2的表达以应用于软骨修复，但如何帮助干细胞大量表达BMP-2来修复软骨缺损处，同时避免BMP-2所造成的骨化是目前仍未解决的问题。

发明内容

本发明以实验证实以含有玻尿酸的微环境配合辛伐他汀（simvastatin）处理脂肪干细胞，除了可以加强脂肪干细胞合成骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、软骨分化基因（Sox-9、软骨蛋白聚糖（Aggrecan）及第二型胶原蛋白（Col II））、关节软骨的细胞外间质（sGAG），同时也可以减少辛伐他汀所诱发的骨钙素（osteocalcin）的表达，可减少细胞硬骨化的产生，以应用于软骨缺损的修补。

本发明除了发现以辛伐他汀配合玻尿酸具有诱导干细胞软骨化的功效，更进一步以纤维蛋白作成一三维水凝胶载体，以包覆玻尿酸及干细胞外，并将一含有辛伐他汀的微球（microsphere）加入该载体内，会更有效的促进BMP-2的表达，增加软骨化基因的表达量，及增强脂肪干细胞生成硫酸化葡萄胺聚糖（一种主要的关节软骨细胞外间质）的含量；并在迷你猪的软骨缺损的动物模式中，也发现该本组合（脂肪干细胞结合辛伐他汀及玻尿酸）的方式，具有修复关节软骨缺损的功效。