[发明专利]蒲葵提取物单体、其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程领域，尤其涉及一种蒲葵提取物单体、其制备方法以及其应 用。

背景技术

蒲葵，属于棕榈科蒲葵属，拉丁名为Livistonachinensis，喜温暖、湿润、向阳的 环境，分布在热带、亚热带地区，常用来绿化，此外，蒲葵还具有药用价值。

蒲葵是一种多年生常绿高大的乔木，形态特征如下：单干，高5-20米，直径20-30厘 米，根部常膨大。叶阔呈肾状扇形，其直径1米余，掌状深裂至中部，裂片条状且披针形；叶柄 长1-2米，下部两侧有沟刺。花序呈圆锥状，长约1米，分支多而疏散；花萼裂至近基部成近尖 状裂片，裂片有宽的干膜质的边缘；子房上面有深雕纹，花柱突变成钻状；果实黑褐色呈椭 圆形，长1.4-2.2厘米，直径1-1.2厘米；种子椭圆形，长1.5厘米，直径0.9厘米。

在中医临床上，蒲葵根具有止痛作用，蒲葵叶具有收敛止血止汗作用，蒲葵子具有 止痛及败毒抗癌、消淤止血之功效。民间常用其治疗白血病、鼻咽癌、绒毛膜癌、食道癌[陈 艳,林新华,李少光,翁绳美,姚宏.蒲葵子的体外抗癌活性.福建医科大学学报[J],2008,2: 93-95.；曾春晖杨柯郑作文.蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用的实验研究.广西中医药 [J],2007,30(1):58-59.]。但尚无其它临床应用的报道。

宫颈癌是一种在女性癌症患者中仅次于乳腺癌和大肠癌的恶性肿瘤，在发展中国 家是第二常见的恶性肿瘤，仅次于乳腺癌。宫颈癌的具体发病机制尚不清楚，主要与病毒感 染、基因突变、端粒酶活性、激素异常、营养不良、免疫功能异常等诸多因素有关。目前，宫颈 癌的治疗方案主要包括手术切除和放射疗法。化疗是一个重要的治疗手段，特别适用于晚 期和转移性的治疗。但在化疗的过程中，一些癌细胞可出现不同程度的耐药性现象。此外， 大多数化疗药物的毒性大，化疗后大多数患者出现很多不良反应，所有这些使化疗药物应 用受到一定限制。因此，寻找一种新的有效且低毒的化疗药物具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，旨在提供一种蒲葵提取物单 体及其制备方法和应用。

本发明所述蒲葵提取物单体所采用的技术方案是，该单体的结构如下：

本发明上述蒲葵提取物单体的制备方法所采用的技术方案是：该方法用有机溶剂提取 并经过硅胶柱和HPLC分离得到蒲葵提取物单体。

一个优选的方案是，上述方法的具体步骤为：

（1）将蒲葵原料洗净，烘干，粉碎至20-100目，得到干粉；

（2）取步骤（1）得到的干粉，加入70%的乙醇水溶液，室温条件下静置浸提24小时并循环 回流，其中加入的干粉和乙醇水溶液的质量/体积比为w/v=1:20；

（3）将步骤（2）得到的全部液体在50℃的真空下将有机溶剂蒸发，得到棕色浆状粗提取 物，该粗提取物悬浮于水，用氯仿萃取，将上述提取物过200-300目硅胶柱，用氯仿-甲醇溶 液洗脱硅胶柱上的成分，用HPLC纯化分离即得到蒲葵提取物单体。

进一步优选的方案是，所述蒲葵原料为蒲葵的种子、根或叶。

由上述方法制备得到的蒲葵提取物单体在抑制宫颈癌细胞中的应用。

所述应用为如下的至少一种：

（1）抑制宫颈癌细胞的增殖和/或生长；

（2）抑制宫颈癌细胞的克隆形成；

（3）促进宫颈癌细胞凋亡；

（4）降低宫颈癌细胞线粒体膜电位并使膜完整性受损；

（5）将宫颈癌细胞的细胞周期抑制在G1/S期；

（6）上调G1/S期的细胞周期蛋白CyclinA2和细胞周期依赖性激酶CDK2蛋白的表达水 平，同时升高P21蛋白的表达水平；

（7）裸鼠体内亦可抑制宫颈癌细胞增殖和/或生长；

（8）治疗宫颈癌。