[发明专利]一种治疗乳腺癌的CAR-T细胞制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种治疗乳腺癌的CAR-T细胞制剂，其特征在于：它是由嵌合了乳腺癌细胞抗原受体 HCA153-HER2scFv-CD8-OX40-CD3ζ的CAR-T细胞、人血白蛋白、IL-6受体拮抗药物，制剂的 优选配比为：CAR-T细胞的浓度为（4～6）×107个/ml，质量体积比为2%的人血白蛋白，8mg/ mLIL-6受体拮抗药物Tocilizumab，余量为生理盐水。

2.根据权利要求1所述，CAR-T细胞的靶细胞抗原为如下单一抗原或几个抗原的组合： CA153人表皮生长因子受体-2（HER2）、组织因子（TF）、表皮生长因子受体（EGFG）、血小板衍 生生长因子受体（PDGFR），优选HER2和CA153的组合。

3.根据权利要求1所述，CAR-T细胞中CAR是HCA153-HER2scFv-CD8-OX40-CD3ζ，CAR的具 体组成为：抗原抗体结合区HCA153-HER2scFv、CD8铰链区、OX40跨膜区和胞内区以及CD3ζ胞 内信号区串联构成。

4.根据权利要求1所述，CAR-T细胞的靶细胞抗原为CA153-HER2。

5.根据权利要求1所述，一种治疗乳腺癌的CAR-T细胞制剂的制备方法，主要包括以下 步骤：

（1）载体构建：构建能够表达HCA153-HER2scFv-CD8-OX40-CD3ζ的载体；

（2）转染T细胞的病毒的包装：采用步骤（1）中构建的载体包装慢病毒，获得经过包装的 慢病毒；

（3）T细胞分离与扩增培养：抽取患者自身血液，从中分离出T细胞并进行扩增培养；

（4）T细胞的转染与制备：采用步骤（2）中经过包装的慢病毒对步骤（3）中培养所得T细 胞进行转染并扩增培养，获得CAR-T细胞；

（5）将步骤（4）制备的CAR-T细胞与人血白蛋白、IL-6受体拮抗药物Tocilizumab按比例 混匀，余量用生理盐水补足，制备成CAR-T细胞制剂。