[发明专利]一种检测试剂盒及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种检测试剂盒及其应用。

背景技术

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2type，PCV2)可引发一系列猪圆环病毒病包括断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning Multisystcmic Wasting Syndrome，PMWS)、仔猪A2型先天震颤(A2CT)、猪繁殖障碍、猪皮炎肾炎综合征、增生性坏死性肺炎和呼吸道疾病综合征，特别是PMWS的主要病原。PMWS主要侵害6-8周龄的仔猪，发病率一般为10％-20％，病死率高达50％-100％，并能造成免疫抑制降低抗病力；成年猪一般为隐性感染，不表现任何症状，但可以传染给仔猪。这些疾病的广泛流行严重影响了养猪业的发展，给许多国家和地区带来了巨大的损失。

猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)又称经典猪瘟或古典猪瘟，家猪和野猪是猪瘟病毒唯一的自然宿主，可引发猪瘟。其中，猪瘟是一种急性、热性、高度接触性传染病，可表现为急性、慢性、非典型或母猪繁殖障碍的病程，被世界动物卫生组织OIE列为A类疫病，在我国也被列为I类动物传染病。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly pathogenic Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)引发的高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)于2006年在我国大规模爆发，之后在越南、老挝等国家爆发，以高热、高发病率、高死亡率、较低的低治愈率为主要临床特征，给养猪业造成了极其严重的打击。

随着规模化猪场的增加，猪疫病的种类也不断增加，旧的疫病没有消灭，新的疫病不断出现，并且随着病毒株的变异使猪的疫病日益呈现复杂化和严重化趋势。PCV2、CSFV、HP-PRRSV均能不同程度的导致妊娠母猪的繁殖障碍，并且经常混合感染，引起母猪流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等，在猪群中具有传播快、胚胎致死率高、流行范围广、传播途径多、病原体顽固等特点，每年给养猪业造成了巨大损失。因此，亟需研发能实现PCV2、CSFV、HP-PRRSV的检测方法。

目前，检测这几种病毒的方法包括病毒分离鉴定，但操作过程繁琐、耗时过长；PCR或基因芯片检测，但需要专门的仪器和专业的操作人员，这些方法均不适合基层或现场快速检测。因而，亟需研制一种能简单、快速、准确、同时检测这几种病毒的方法。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种检测试剂盒，该试剂盒可简单、快速、灵敏度高并同时检测出至少两种病毒。

本发明涉及一种检测试剂盒，其中，所述试剂盒包括有效量的抗猪圆环病毒2型单克隆抗体PCV2-McAB1、PCV2-McAB2，以及用于检测猪圆环病毒2型抗原抗体反应的检测试剂；有效量的抗猪瘟病毒单克隆抗体CSFV-McAB3、CSFV-McAB4，以及用于检测猪瘟病毒抗原抗体反应的检测试剂；和/或有效量的抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体PRRSV-McAB5、PRRSV-McAB6，以及用于检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原抗体反应的检测试剂；其中，所述单克隆抗体PCV2-McAB1为抗猪圆环病毒2型单克隆抗体2F8或3G12，所述单克隆抗体PCV2-McAB2重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.2和/或轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.4；所述单克隆抗体PCV2-McAB1固定在支持介质上，所述单克隆抗体PCV2-McAB2溶解于反应液中；所述单克隆抗体CSFV-McAB3、CSFV-McAB4能同时与猪瘟病毒产生抗原抗体结合反应，所述单克隆抗体CSFV-McAB3固定在支持介质上，所述单克隆抗体CSFV-McAB4溶解于反应液中；所述单克隆抗体PRRSV-McAB5、PRRSV-McAB6能同时与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒产生抗原抗体结合反应，所述单克隆抗体PRRSV-McAB5固定在支持介质上，所述单克隆抗体PRRSV-McAB6溶解于反应液中。