[发明专利]一种检测诊断主动脉夹层病致病基因的DNA文库及其应用

权利要求书

1.一种基于Ion TorrentTM高通量测序技术诊断主动脉夹层的DNA文库，其特征在于，该文库包括33个主动脉夹层致病相关基因，其中，所述33个主动脉夹层致病相关基因如下表所示：

2.权利要求1所述的DNA文库在制备诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒用于诊断主动脉夹层。

3.权利要求1所述的DNA文库在制备诊断装置中的应用，其特征在于，所述诊断装置用于诊断主动脉夹层。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述诊断装置是测序芯片。

5.如权利要求2-4任一权利要求所述的应用，其特征在于，所述应用包括下列步骤：

(1)提供受试者样本的基因组DNA；

(2)利用权利要求1所述的DNA文库从Ion TorrentTM高通量测序平台自动合成覆盖全部33个致病基因的扩增引物文库，对目标区域进行超多重PCR扩增；

(3)对步骤(2)得到的扩增产物进行酶切；

(4)对步骤(3)得到的酶切产物加Barcode接头；

(5)对步骤(4)得到的连接产物进行纯化；

(6)对步骤(5)得到的纯化产物用通用引物进行二次扩增；

(7)对步骤(6)得到的二次扩增产物进行片段选择及浓度测定，即建成患者目标区域扩增文库；

(8)对步骤(7)所得到的文库经过油包水PCR扩增反应后，将待测序目的片段连接于ISP珠子，得到反应液；

(9)将步骤(8)得到的包含ISP珠子的反应液点入芯片，上Ion TorrentTM高通量测序进行测序；

(10)将步骤(9)得到的碱基序列信息进行生物信息学比对处理，得到与疾病相关的突变位点；

(11)对步骤(10)得到的突变位点进行Sanger测序法验证。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述样本来自受试者的外周血、体液、组织器官样本。

7.一种诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的DNA文库。

8.一种诊断装置，其特征在于，所述装置包括权利要求1所述的DNA文库。

9.如权利要求8的诊断装置，其特征在于，所述诊断装置是测序芯片。