[发明专利]一种提高阿维拉霉素发酵产量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提高阿维拉霉素发酵产量的方法，属于生物制药技术领 域。

背景技术

阿维拉霉素(Avilamycin)又名卑霉素，属寡糖类抗生素，是一种使用 效果卓越的动物专用抗生素。阿维拉霉素约有A、B、C、D、E、F、G、H等 12种组分，其中最具活性的是阿维拉霉素A组分，阿维拉霉素具有较高的安 全性，在肠道中不吸收，在畜产品中无残留，排泄后(包括分解物)对环境 安全；在配合饲料的制作中，很少产生粉尘等污染；在畜禽饲料中添加使用 时，无需停药期。由于卓越的使用效果，阿维拉霉素己在世界40多个国家 广泛使用。

申请号为200910017738.8，发明名称为“生产动物专用抗生素阿维拉霉 素的菌株及方法”的发明专利中所采用的发酵方法，没有进行补料和变温培 养，效价较低，阿维拉霉素A组分和B组分低。

发明内容

本发明人研究发现，阿维拉霉素是绿色产色链霉菌次级代谢的产物，所 以在发酵过程中利用变温培养,并流加碳源糊精和氮源硫酸铵，让其在后期 处于次级代谢过程，更有利于阿维拉霉素A组分的生成，进而提高了阿维拉 霉素的发酵产量。

另外阿维拉霉素具有发酵周期较长，关键控制点较多，组分难以控制， 前体成本较高等特点，因此采用流加价格便宜的碳源和氮源，更适合阿维拉 霉素发酵水平的提高，控制成本，提高经济效益。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种提高阿维拉霉素发酵产 量的方法，包括：

1)取菌种，接种到种子培养基中，接种量为25mm²的斜面，振幅5cm的 摇床转速为220-250rpm，27.0-29.0℃培养24-26h，种子培养基的pH值为 6.40-6.70，

所述菌种为绿色产色链霉菌，拉丁文学名为streptomyces viridochromogenes，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 心，保藏日期2009年7月21日，保藏编号CGMCCNo.3198，

所用种子培养基以原料总重量的百分含量计，由以下原料组成：低温黄 豆饼粉1.5％-2.0％、干酵母0.2％-0.3％、葡萄糖0.25％-0.5％、糊精1.0％-2.0％、 氯化钙2.0％-3.0％、碳酸钙0.1％-0.2％和水余量；

2)将1)培养好的菌种接种至发酵培养基中，接种量占发酵培养基质量 的10％-13％，在发酵20-24h后加入质量分数6％-8％的L-缬氨酸溶液，所用 L-缬氨酸质量占发酵培养基质量的0.1％-0.15％，在发酵过程中向发酵液流加 碳源糊精和氮源硫酸铵，发酵培养基的pH值为7.00-7.20，通气量为 0.6-1.3vvm，转速为200-400rpm，采用变温发酵210-220h，即得，

所用发酵培养基以原料总重量的百分含量计，由以下原料组成：

葡萄糖2.0％-3.0％、低温黄豆饼粉1.25％-1.5％、玉米淀粉6.0％-8.0％、 豆油0.4％-0.6％、氯化钙1.0％-2.0％、碳酸钙0.3％-0.5％、氯化钠0.05％-0.1％、 硝酸钠0.45％-0.6％、硫酸镁0.0035％-0.0045％、硫酸铜0.0025％-0.0035％、 硫酸铵0.2％-0.4％和水余量。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，在2)中，所述流加碳源糊精的开始时间为发酵115-120h时， 结束时间为发酵190-200h时，糊精的流加量为每立方米发酵液每天流加 8-12kg。

进一步，在2)中，所述流加氮源硫酸铵的开始时间为发酵55-60h时， 结束时间为发酵210-220h时，硫酸铵的流加量为每立方米发酵液每天流加 0.15-0.25kg。

进一步，在2)中，所述变温发酵指在发酵过程中，发酵的前38-42h 采用的发酵温度为28.0-29.0℃，在发酵38h-42h之后采用的发酵温度为 26.0-27.0℃。

本发明的有益效果是：

本发明提供一种提高阿维拉霉素发酵产量的方法，本发明利用在发酵过 程中进行变温培养，并在培养过程中流加碳源糊精和氮源硫酸铵，生产阿维 拉霉素，提高阿维拉霉素A组分含量，进而提高了阿维拉霉素的发酵产量。