[发明专利]赤霉素GA4+7的高产菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及赤霉素GA₄₊₇的高产菌株及其应用。

背景技术

赤霉素(Gibberellins，简称GAs)，又称九二零，是一种天然的植物生长调节剂。赤霉素属于生物体内的一类四环二萜类化合物，至今已发现100多种。常见具有生物活性的主要有赤霉素GA₁、GA₃、GA₄、GA₇等，其化学结构式如下所示：

赤霉素与生长素(auxin)、细胞分裂素(CTK)、脱落酸(ABA)、乙烯(ETH)以及油菜素甾醇(BR)并列为植物六大激素。赤霉素主要对植物生长具有多种生理功能，可以调节植物生根、发芽、生长以及开花结果等过程，因此赤霉素在农业生产和酿造业中有着广泛的应用。随着赤霉素保鲜作用的发现，赤霉素在果蔬保鲜方面的应用也越来越多。另外，赤霉素对花卉的保鲜作用也有报道。赤霉素GA₃是应用最为广泛的赤霉素。研究发现，赤霉素GA₃存在生理活性过强、作用效果单一等局限性，而GA₄和GA₇的混合物(缩写为GA₄₊₇)以其较高的生理活性和独特的作用效果慢慢成为新的研究热点。

赤霉素广泛分布于自然界，绿色植物、褐藻、绿藻、真菌和细菌中都发现有赤霉素的存在。尽管绿色植物自身能产生多种赤霉素，但含量甚微，往往仅能满足自身的需求，不适于工业化生产，而微生物生长迅速，不受季节影响，生长周期短，赤霉素含量高等优点，所以所有赤霉素均是通过微生物发酵生产。现有技术中，采用微生物发酵生产GA₄₊₇的产量较低、发酵时间过长。

发明内容

本发明的目的是提供一株高产赤霉素GA₄₊₇的藤仓赤霉。

本发明的目的采用如下技术方案实现。

赤霉素GA₄₊₇的高产菌株，该菌株为藤仓赤霉(Fusariumfujikuroi)NJtech02，保藏编号为CCTCCNO:M2015614。

本发明还提供所述菌株在制备赤霉素GA₄₊₇中的应用。

本发明还提供采用所述菌株制备赤霉素GA₄₊₇的方法，包括将藤仓赤霉(Fusariumfujikuroi)NJtech02接种至发酵培养基，双阶段发酵培养藤仓赤霉(Fusariumfujikuroi)NJtech02的步骤；所述双阶段发酵培养藤仓赤霉NJtech02包括发酵前期和后期；在发酵前期，培养温度为27～29℃，摇床转速为200～250rpm，控制发酵液pH为4.0～5.0，培养时间为12-48h；在发酵后期，培养温度为30～32℃，摇床转速为300～400rpm，控制发酵液pH为6.5～7.5，培养时间为3-5天。

优选的技术方案中，所述发酵培养基含有：葡萄糖70-85g/L，小麦蛋白3-4.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.1-0.4g/L，KH₂PO₄1.0-2.0g/L，NaMoO₄·2H₂O0.03-0.06g/L，微量元素溶液1-2ml，pH为4.0-5.0；微量元素溶液是含有下述成分的水溶液：H₃BO₃290-310mg/L，MnCl₂·4H₂O90-110mg/L，ZnSO4·7H₂O90-110mg/L，FeCl₃·6H₂O190-210mg/L，CuCl₂·2H₂O480-520mg/L。

在本发明中，将藤仓赤霉(Fusariumfujikuroi)NJtech02接种于试管斜面培养基，培养后制备孢子悬浮液，然后接种于种子培养基，收获种子液再转接至发酵培养基。

在本发明中，所述斜面培养基为PDA培养基。