[发明专利]制备柠檬酸的方法

权利要求书

1.一种制备柠檬酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1：种子培养阶段

1)种子培养基

自来水与玉米粉按质量比5：2的比例混合，110℃保温并不断搅拌，并加入α-高温淀粉酶，恒温30min，用碘指示剂检验不变蓝，即糖化完全，冷却，回复原来体积，得到玉米粉糖化液；

将玉米粉糖化液经两层纱布过滤得糖化清液；

用盐酸调节pH值到4.5～5.0，在摇瓶中加入玉米粉糖化液，纱布封口，121℃灭菌25min，得种子培养基；

2)种子培养条件

将黑曲霉(2330～2335)菌种按照接种量为5.0×10⁵个孢子接种到种子培养基中，置于旋转式摇床上，在转速160r/min、温度34±1℃的条件下，进行培养22h以得到种子液；

步骤S2：发酵产酸阶段

1)发酵培养基

将玉米粉糖化液与糖化清液按体积比1：5的比例混合；在全自动发酵罐中加入混合后的培养基，添加0.3％(重量百分比)的(NH₄)₂SO₄，调pH值到4.5～5.0，115℃灭菌25min，得到发酵培养基；

2)发酵条件

将步骤S1中得到的种子液加入到发酵培养基中进行发酵以生成柠檬酸，发酵时，在温度为34±1℃下通气培养，采用液氨调节培养基的pH，使pH值维持在4.4～4.8，发酵培养72小时后，发酵完毕；

其中，所述种子培养基和所述发酵培养基中均包括通式(1)化合物中的至少一种；

所述通式(1)化合物中的R为C₁～C₂₀烷基，所述通式(1)化合物在所述种子培养基和所述发酵培养基中的浓度均为0.15～7g/L。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述通式(1)化合物中的R为C₁～C₁₂烷基。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述通式(1)化合物为甜菜碱、月桂基甜菜碱、辛基甜菜碱或异丙基甜菜碱。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述通式(1)化合物为无水甜菜碱、一水甜菜碱、盐酸盐甜菜碱或磷酸甜菜碱。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述通式(1)化合物在所述种子培养基和所述发酵培养基中的浓度均为0.5～5g/L。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述通式(1)化合物在所述种子培养基中的浓度为0.6～1g/L，所述通式(1)化合物在所述发酵培养基的浓度为2g/L。