[发明专利]一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法在审
申请号: | 201610010554.9 | 申请日: | 2016-01-08 |
公开(公告)号: | CN105461831A | 公开(公告)日: | 2016-04-06 |
发明(设计)人: | 张在忠;郭林;李荣;陈少鹏;李玮涛 | 申请(专利权)人: | 东营天东制药有限公司 |
主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10;C08B37/08 |
代理公司: | 北京一格知识产权代理事务所(普通合伙) 11316 | 代理人: | 滑春生;赵永伟 |
地址: | 257081 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 分离 移动 肝素 硫酸 皮肤 方法 | ||
1.一种快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于,该快速分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法包括:
步骤一,以浓度为0.04M的醋酸钡溶液为缓冲液,配制胶浓度0.4%-0.8%
的琼脂糖凝胶,胶厚度在3-5mm,梳齿之间距离在5mm;
步骤二,每个点样孔上样量在5-10微克;
步骤三,将凝胶置于0.04M醋酸钡溶液缓冲液中,缓冲液顶部没过凝胶
1-2mm,然后在缓冲液上层加入石油醚,封住气液界面;
步骤四,将整个电泳槽体系置于冷室中,电泳槽两端连接电泳仪电源,施
以120V电压,电泳时间为2小时;
步骤五,电泳完毕,将凝胶板取出,在Cetavlon浸透大于3小时,取出后以干燥滤纸铺盖于凝胶上,轻压脱水;
步骤六,将0.2%的甲苯胺蓝溶解在乙醇:水:乙酸比例为40:9:1形成的溶剂中,配制染色液,将凝胶悬浮在染色液中,放于摇床缓慢振荡染色30-60分钟,然后用乙醇:水:乙酸比例为50:49:1混合成的溶液洗涤。
2.如权利要求1所述的分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于:所述步骤一所配制的胶浓度为0.6%。
3.如权利要求1所述的分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于:所述步骤一所配置的胶厚度为3mm。
4.如权利要求1所述的分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于:所述步骤二中上样量为10微克。
5.如权利要求1所述的分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于:所述步骤一和步骤三的浓度为0.04M的醋酸钡溶液pH为5.8。
6.如权利要求1所述的分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于:所述步骤四中所用冷室温度为4℃,所述步骤五Cetavlon为0.1%浓度溶液。
7.如权利要求1所述的分离快速移动肝素与硫酸皮肤素的方法,其特征在于:所述步骤六中染色时间为1小时。
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