[发明专利]一种检测内切酶的电化学发光生物传感器及其制备与应用

权利要求书

1.一种检测内切酶的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S01.对玻碳电极进行预处理；

S02.采用循环伏安法制备金纳米-石墨烯修饰的玻碳电极；

S03.分别制备浓度为1～10 μM的 Ru(bpy)32+标记的B-DNA信标，和浓度为1～10 μM的二茂铁标记的C-DNA信标；

S04.将所述步骤S02所得到金纳米-石墨烯修饰的玻碳电极浸入含有巯基修饰的A-DNA中培育3～6 h，然后依次浸入步骤S03所得Ru(bpy)32+标记的B-DNA信标和二茂铁标记的C-DNA信标20～40min，即得到检测内切酶的电化学发光生物传感器；

所述巯基修饰的A-DNA序列为5’-SH-(CH2)6-GGGGTTGGGGAAGGGTACGAGGAATTCCGGGTTGGG-3’；所述Ru(bpy)32+标记的B-DNA序列为5’-NH2-(CH2)6-CCCTTCCCCAACCCC-3’；所述二茂铁标记的C-DNA序列为5’-CCCAACCCGG AATTCCT-(CH2)6-NH2-3’；

或者所述巯基修饰的A-DNA序列为5’-SH-(CH2)6-GGGGTTGGGGAAGGGTACGAGGATCCGGGTTGGG-3’；所述Ru(bpy)32+标记的B-DNA序列为5’-NH2-(CH2)6-CCCTTCCCCAACCCC-3’；所述二茂铁标记的C-DNA序列为5’-CCCAACCCG GATCCT-(CH2)6-NH2-3’。

2.根据权利要求1所述检测内切酶的电化学发光生物传感器的制备方法，其特征在于，所述金纳米-石墨烯修饰的玻碳电极的制备方法为：采用浓度为0.5～1mgmL-1的氧化石墨烯和20～60mM氯金酸，在-1.5～0.5V的范围内通过循环伏安法将金纳米-石墨烯沉积到玻碳电极表面，扫描速度10mVs-1。