[发明专利]一种定性判断材料抗菌率的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种定性判断材料抗菌率的方法及其应用。

背景技术

抑菌圈法是定性判定材料抗菌率的常用方法，抑菌圈的大小代表被测物质抗菌力的强弱。此方法是将菌液与营养物质混合固化成实验平板，把被测材料加工成圆盘置于平板中央。在37℃培养18h后，此圆盘上会出现菌生长禁止圈(抑菌圈)，通过比较抗菌材料与参比材料的抑菌圈面积，来评价抗菌性能的大小。

抑菌圈法可以定性的评估抗菌剂对细菌的抑菌活性，其中杯碟法和纸片法应用最为广泛，但是这两种方法在定性实验实施中出现了弊端。例如，利用纸片法在测试材料的抑菌性时，在取样品时，样品的浓度随机性较高，抗菌剂在琼脂里的扩散程度在一定程度上会影响抑菌圈的大小，该方法定性结果可信度差；杯碟法对于测试溶解度小的抗菌剂来说抑菌测试结果一般，抗菌剂在琼脂里的扩散程度在一定程度上也会影响抑菌圈的大小，结果可信度不高。

为了克服上述弊端，实施一种适用于溶解性差，在琼脂里扩散程度小，分解温度高的抗菌剂定性测试抑菌性的方法，并加以应用，这也是本发明的创新之处。

发明内容

本发明是要解决杯碟法和纸片法在定性试验中产生弊端的情况下而提供的一种定性判断材料抗菌率的方法及其应用。

本发明一种定性判断材料抗菌率的方法具体步骤为：

①胰蛋白胨10~15g，酵母提取物5~10g，NaCl10~15g，琼脂粉10~15g，加入850~900mL去离子水中。摇动容器直至溶质溶解，定容1~1.5L；

②将溶液分装于50~00mL的锥形瓶内，将称量好的抗菌剂（不同浓度梯度，包括空白组）分别加入到标记好相应浓度的锥形瓶内摇匀，用3~5mol/LNaOH调pH至7.0~7.4。将培养液放到高压灭菌锅内灭菌（0.05~0.1MPa，15~20min）；

③灭菌好的带有抗菌剂的培养基分别倒入标记好相应浓度的培养皿中，冷却定型。将菌液涂覆于不同梯度和空白组的培养基中，放入细菌培养箱培养；

④24~48小时后观测灭菌效果，量取抑菌直径，进行抑菌评价。

本发明的优点：便于操作，定性容易，得到的对比图易分析，数据可靠。适用对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等常见菌种的抑菌测试。

附图说明

以下结合附图和具体实施方式对本发明加以详细说明。

图1为抗菌剂的IR图

图2为抗菌剂的UV图

图3为抗菌剂的TG图

图4为抗菌剂的SEM图

图5为未加抗菌剂前大肠杆菌菌落图

图6为加入抗菌剂后大肠杆菌的抑菌图

图7为未加抗菌剂前金黄色葡萄球菌落图

图8为加入抗菌剂后金黄色葡萄球菌的抑菌图

图9为未加抗菌剂前枯草芽孢杆菌菌落图

图10为加入抗菌剂后枯草芽孢杆菌的抑菌图

具体实施方式

实施例1：自制抗菌剂杂多酸盐MnMo₁₁Ni，称取5.035gNa₂MoO₄·2H₂O溶于100.0mL去离子水中，0.318gMnSO₄·H₂O溶于10.0mL去离子水中，0.214g3CdSO₄·8H₂O溶于10.0mL去离子水中（超声溶解），用冰乙酸酸化Na₂MoO₄·2H₂O溶液直至pH=6左右，在不断的搅拌下加入MnSO₄·H₂O溶液，继续酸化混合液至pH=5～6，在70oC左右的条件下加热搅拌混合液至澄清（过程中会出现沉淀，在搅拌的过程中要不断调节pH），然后分几次加入3CdSO₄·8H₂O溶液，在70～80oC下继续反应1h，冷却至室温，在不断的搅拌下分批加入适量的固体KCl，再加入无水乙醇，静置，下层出现黄色沉淀，放在冰箱中结晶3天，抽滤，干燥，得到的黄色粉末为MnMo₁₁Ni。