[发明专利]一种稳心颗粒的高效液相检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种稳心颗粒的高效液相检测方法，属于中成药检测分析领域。

背景技术

稳心颗粒是由党参、黄精、三七、琥珀、甘松等五味中药经过提取加工制成的中药制剂，其药理作用为增强心肌收缩力、改善微循环、增强窦房结功能及抗心律失常等。功能主治为：益气养阴，活血化瘀。用于气阴两虚，心脉瘀阻所致的心悸不宁、气短乏力、胸闷胸痛、室性早搏、房性早搏见上述证候者。

由于稳心颗粒在治疗心率失常疾病方面具有良好的治疗效果。然而2015年版中国药典仅对于稳心颗粒中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁的含量进行定量检测，而对于文献颗粒中的君药党参未做含量检测。为了进一步保证稳心颗粒内在质量，本发明在人参皂苷Rb₁含量的基础上增加了高效液相法测定人参皂苷Rd与党参炔苷的含量，使稳心颗粒的质量控制的指标更加全面。

发明内容

本发明的目的是提供一种稳心颗粒的高效液相检测方法，该检测方法可以有效对稳心颗粒中的三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd与党参炔苷含量进行测定，进一步提高稳心颗粒质量控制标准，以保证稳心颗粒内在质量。

本发明所述稳心颗粒的高效液相检测方法，包括如下骤：

(a)混合对照品溶液的制备：取三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd及党参炔苷，精密称定，加甲醇溶解，配制成三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd及党参炔苷的混合对照品溶液，即得；

(b)供试品溶液的制备：取稳心颗粒内容物，研细，精密称定，加水饱和的正丁醇，称定重量，浸泡，超声处理，放冷，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

(c)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为A流动相，以水为B流动相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：22～95：78～5，进行线性梯度洗脱；进样体积10μL；流速0.8～1.2mL/min；柱温25～29℃，检测波长为210nm，理论板数按人参皂苷Rg₁峰计算应不低于2000；

(d)色谱峰测定：分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，计算同一保留时间下的峰面积，代入标准曲线方程，即计算出三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd及党参炔苷的含量。

作为本发明的优选，所述步骤(a)混合对照品溶液的制备中，所述三七皂苷R₁浓度为8～247μg/mL、人参皂苷Rg₁浓度为14～422μg/mL、Rb₁浓度为26.5～847μg/mL、Rd浓度为8～255μg/mL、党参炔苷浓度为1.5～42μg/mL。

作为本发明的优选，所述步骤(b)供试品溶液的制备中，取稳心颗粒内容物，研细，取约1g，精密称定，加水饱和的正丁醇50mL，密塞，称定重量，浸泡12h，超声处理，放冷，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

作为本发明的优选，所述步骤(c)的色谱条件中，所述流动相A相为乙腈，所述流动相B相为水，其流动相所采用的线性梯度洗脱条件为：

0-14min，流动相A相所占的体积比为：22％→30％A，流动相B相所占的体积比为：78→70％；

14-35min，流动相A相所占的体积比为：30％→38％，流动相B相所占的体积比为：70→62％；

35-45min，流动相A相所占的体积比为：38％，流动相B相所占的体积比为：62％；

45-47min，流动相A相所占的体积比为：38％→95％，流动相B相所占的体积比为：62→5％；

47-62min，流动相A相所占的体积比为：95％，流动相B相所占的体积比为：5％；