[发明专利]神经干细胞在介导影响P25和P35蛋白表达中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域。更具体地，涉及神经干细胞在介导P25和P35蛋白表达从而促进缺血缺氧性脑病新生大鼠神经功能恢复方面的应用。

背景技术

围产期窒息所致缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemicencephalopathy，HIE）是一种常见的脑损伤疾病，该病是新生儿期危害最大的常见病之一，常引起新生儿死亡和严重神经系统发育障碍。据统计，我国新生儿HIE发生率约为活产儿的3‰～6‰，其中15%～20%在新生儿期死亡，存活者中20%～30%可能遗留不同程度的神经系统后遗症。另外，还有包括阿尔茨默氏病、肌萎缩侧索硬化症、帕金森病等各种神经变性疾病，已严重威胁人类的健康，

目前为止，针对脑损伤和神经系统变性性疾病，尚无有效的治疗手段。研究显示，P35和P25蛋白是细胞周期素依赖蛋白激酶5（Cdk5）的调节亚基，Cdk5在哺乳动物海马神经元的学习和记忆功能中发挥重要作用。生理状态下，CDk5在p35等调节亚基的信号作用下锚定于膜上，磷酸化膜性底物，通过平衡促凋亡和促存活信号转导通路，在神经元发育、迁移、神经元存活中发挥重要作用。也有研究显示，P35蛋白是大脑皮层中cdk5的特异性激活剂，能够被钙激活中性蛋白（calpain）分解为P25并与cdk5结合使之激活，参与神经细胞的歉意、分化、细胞凋亡和信号传导等过程。而Cdk5在多种人类神经退行性疾病中起非常重要的作用，可能是构成包括阿尔茨默氏病、肌萎缩侧索硬化症、帕金森病等神经变性疾病的主要分子病理基础。

因此，针对P35和P25蛋白的调控从而治疗相关的脑损伤和神经变性疾病，是一种探索脑类疾病治疗药物的新方向和有效途径。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有HIE等脑损伤或神经变性疾病治疗技术的缺陷和不足，提供一种能够针对调控P35和P25蛋白的表达，从而实现HIE等脑损伤或神经变性疾病治疗目的的药物。本发明研究显示，神经干细胞（neuralstemcells，NSC）能够调控P25、P35蛋白的表达变化，具体是上调P35蛋白表达、下调P25蛋白表达，抑制Cdk5的过度激活，从而对脑损伤起到保护治疗作用，对缺血缺氧性脑病等疾病有显著的疗效。

本发明的目的是提供神经干细胞在制备P25和/或P35蛋白表达调控剂方面的应用。

本发明另一目的是提供神经干细胞在制备脑损伤或神经变性疾病治疗药物方面的应用。

本发明再一目的是提供神经干细胞在制备缺血缺氧性脑病治疗药物方面的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

神经干细胞在制备P25和/或P35蛋白表达调控剂方面的应用。

具体地，是神经干细胞在制备P25蛋白表达抑制剂方面的应用，以及神经干细胞在制备P35蛋白表达促进剂方面的应用。

神经干细胞在制备脑损伤或神经变性疾病治疗药物方面的应用。

其中，所述脑损伤或神经变性疾病是指P25和/或P35蛋白参与调控的脑损伤或神经变性疾病。

更具体地，所述脑损伤或神经变性疾病是指缺血缺氧性脑病

另外，在针对缺血缺氧性脑病治疗药物时，所述药物是指能够保护和/或恢复脑缺血损伤的药物。

更进一步地，所述药物是指能够保护和/或恢复脑缺血损伤，且能够上调P35蛋白表达、下调P25蛋白表达的药物。

本发明为了探讨神经干细胞对P25、P35蛋白表达变化的影响，以及对缺血缺氧性脑病新生大鼠的治疗作用，选取了60只新生7天SD大鼠，按随机数表法分为3组：SHAM组（对照组）：20只，按HIE模型制作过程施予假手术，不给予其他干预。HIE+PBS组（缺血组）：20只，先制成HIE模型，然后给予PBS作为安慰治疗；HIE+NSC组（治疗组）20只，先制成HIE模型，然后给予NSC治疗。分别于干预后第5、7、14、21天进行神经行为学检测（RotarodTest旋转实验和Morris水迷宫测试）。21日后处死采用组织切片HE染色，观察新生大鼠脑损伤的病理变化。组织匀浆法提取海马蛋白，Westernblot法检测海马区P35、P25蛋白的表达。