[发明专利]DNA甲基化分析中DNA样本重亚硫酸盐处理转化率的评估方法

权利要求书

1.一种DNA甲基化分析中DNA样本重亚硫酸盐处理转化率的评估方法，包括以下步骤：

(1)设计并合成下列DNA标准品及引物：

1)标准品1：是指与任何已知物种无同源序列的DNA序列，该序列未经重亚硫酸盐；

2)标准品2：是指标准品1中未甲基化的胞嘧啶全部转化为尿嘧啶后的序列；

3)引物1：是指根据标准品1的序列设计的用于扩增标准品1的检测引物；

4)引物2：是指根据标准品2的序列设计的用于扩增标准品2的检测引物；

(2)使用所述引物1和引物2，以所述标准品1与标准品2按照梯度稀释为模板，分别做标准曲线，其中标准曲线以模板的拷贝数CN对应相应的Ct值；

(3)将标准品1加入到待检测DNA样本中，

(4)将含有标准品1的待检测DNA样本使用重亚硫酸盐进行转化；

(5)使用引物1和引物2，以步骤(4)处理后的DNA样本为模板，分别检测样本中标准品1与标准品2的Ct值；再根据步骤(2)中的标准曲线，计算出样本中标准品1与标准品2相应的拷贝数；

(6)使用计算公式：重亚硫酸盐处理DNA转化率(％)＝标准品2的拷贝数/(标准品1拷贝数+标准品2拷贝数)×100％，计算转化率。

2.根据权利要求1所的方法，其特征在于，所述的标准品1的序列如SEQIDNO.1所示，标准品2的序列如SEQIDNO.2所示。