[发明专利]一种评估子宫内膜容受性的试剂盒及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种评估子宫内膜容受性的试剂盒及其使用方法，属于医学和生物学检测领域。

背景技术

据世界卫生组织评估，目前每7对夫妇中约有1对夫妇存在生殖障碍问题，主要表现为流产或不孕。关注生殖健康是国家发展的重要部分。研究表明，子宫内膜容受性的改变可能是导致生殖障碍的主要因素之一。子宫内膜容受性是指子宫内膜接受胚胎的能力，指子宫内膜处于一种允许胚胎定位、黏附和侵入的状态。该时期又被称为子宫内膜的种植窗期。如果种植窗期子宫内膜对胚胎的容受性发生异常，其对胚胎发生排斥反应，进而不允许胚胎正常着床发育，这一状态将会导致流产或不孕等不良妊娠结局。因此，子宫内膜容受性的评估对于生殖障碍患者的诊治具有重要意义。

目前，临床中子宫内膜容受性的评估手段主要是形态学评估。其评估指标包括三大类：(1)子宫内膜厚度、回声和血流等超声形态；(2)腺体大小、间质疏密和血管丰度等组织活检形态；(3)子宫内膜胞饮突。然而，形态学评估子宫内膜容受性存在一定争议。因为，子宫内膜容受性由一系列细胞和细胞因子相互作用调控，细胞及其分泌的细胞因子在与胚胎接触过程中发挥重要作用。但是，子宫内膜的形态学表征并不能准确反映其细胞和细胞因子的表达情况。

在此背景下，子宫内膜活检结合分子检测等新的评估手段开始发展。因此，子宫内膜容受性生物标记物的研究越来越受到重视。研究表明，子宫内膜免疫细胞在其容受性调控中发挥重要作用。子宫内膜免疫细胞主要包括自然杀伤细胞、巨噬细胞、T细胞和树突状细胞等四大类。并且，各类免疫细胞又分为不同的亚群，在子宫内膜容受性调节中发挥不同的作用。自然杀伤细胞作为子宫内膜中主要的免疫细胞，通过促进滋养层细胞侵入、支持螺旋动脉重构以及调控自身杀伤能力等途径调节子宫内膜容受性，参与胚胎种植。巨噬细胞在子宫内膜局部及系统激素的调节下可以进行亚群的转换，在种植过程中既可以清除病原体，又可以诱导子宫内膜对胚胎的免疫耐受，进而维持成功妊娠。T细胞主要包括辅助性T细胞、杀伤性T细胞以及调节性T细胞。其中，辅助性T细胞主要通过分泌细胞因子，调控子宫内膜的分化，为胚胎种植做好准备；杀伤性T细胞主要通过调控滋养层细胞侵入与分泌毒性颗粒的平衡参与种植过程；而调节性T细胞发挥免疫抑制作用，其通过抑制子宫内膜对胚胎的过度炎症反应，进而维持继续妊娠。树突状细胞作为重要的抗原提呈细胞，根据其成熟程度可以分为两类：未成熟树突状细胞和成熟树突状细胞。未成熟树突状细胞在妊娠中发挥免疫耐受作用，而成熟树突状细胞在妊娠中发挥免疫排斥作用，因此，两者的平衡在子宫内膜接受胚胎过程中同样发挥着必不可少的作用。以上研究结果表明，子宫内膜容受性的调控因素并不是单一的，而是各种免疫细胞相互作用，相互平衡的结果。

但是，目前国内外以子宫内膜免疫细胞作为其容受性评估指标时，多是检测其中一种免疫细胞，并且检测方法各异，分析结果不统一、波动性大。根据这些结果，临床医生不能对患者子宫内膜容受性进行准确评估，故而无法制定完善的治疗方案。因此，开发稳定可靠的子宫内膜多种免疫细胞检测试剂盒可以对子宫内膜容受性进行准确评估，为患者的诊疗提供可靠依据。

目前针对子宫内膜免疫细胞数量的检测方法主要有流式细胞术和免疫组织化学检测两种方法。但是，流式细胞术不能对子宫内膜细胞的定位情况进行分析，并且在制备细胞悬液的过程中存在细胞和抗原丢失等问题。因此，免疫组织化学染色方法成为了更好的选择。在临床上，免疫组织化学染色已经在肿瘤病理诊断中得到了广泛应用，涉及领域包括肿瘤组织起源的鉴别、未分化恶性肿瘤性质的判定、各种形态系统肿瘤鉴别、确定肿瘤原发部位等。其原理是用标记的抗体对细胞或组织内的相应抗原进行定位、定性或定量检测，经过组织化学的呈色反应而呈现醒目的阳性色彩，在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下进行人工计数，或者采用显微镜采集图像并结合病理图片分析软件对其进行定量分析。

但迄今为止，市面上尚未用于评估子宫内膜容受性的试剂盒。

发明内容

本发明的目的，是提供一种评估子宫内膜容受性的试剂盒及其使用方法。该试剂盒用于评估子宫内膜容受性，具有操作简单、灵敏性高、特异性强等特点，且检测结果准确、客观、快捷。