[发明专利]一种磁珠法提取核酸的裂解液有效
申请号: | 201610022017.6 | 申请日: | 2016-01-14 |
公开(公告)号: | CN105420230B | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
发明(设计)人: | 王海滨;王棽;周其玲;冯小霞 | 申请(专利权)人: | 北京纳捷诊断试剂有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京市跃扬知识产权代理事务所(普通合伙) 11559 | 代理人: | 李鹏 |
地址: | 101111 北京市大兴区北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 磁珠法 提取 核酸 裂解 | ||
1.一种磁珠法提取核酸的裂解液,其特征在于,所述裂解液由0.2~0.4N氢氧化钠、0.3~0.6M氯化钾、0.01~0.05%N-月桂酰肌氨酸钠、5mM EDTA、0.3~0.6M Tris-HCl 和1~2%曲通X-100组成;
所述裂解液用于磁珠法提取细胞、细菌、血清、血浆、唾液、尿液或胸腹水中的核酸。
2.根据权利要求1所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液由0.25~0.35N氢氧化钠、0.4~0.5M氯化钾、0.02~0.04%N-月桂酰肌氨酸钠、5mM EDTA、0.4~0.5M Tris-HCL和1~2%曲通X-100组成。
3.根据权利要求2所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液由0.3N氢氧化钠、0.45M氯化钾、0.03%N-月桂酰肌氨酸钠、0.45M Tris-HCL、5mM EDTA和1%曲通X-100组成。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液还包括3~8mMDTT。
5.根据权利要求1~3任意一项所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液还包括不多于0.001wt%的提取指示剂,所述提取指示剂选自溴酚蓝、石绿、甲基红、甲基橙、罗丹名、溴甲酚绿、品红、二甲酚橙、二苯胺或刚果红中的一种。
6.根据权利要求5所述的裂解液,其特征在于,所述提取指示剂为溴酚蓝。
7.一种磁珠法核酸提取的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括如权利要求1~3任意一项所述的裂解液和洗涤液。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述洗涤液为0.3~0.6M氯化钾溶液,所述洗涤液的pH值为4~5。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述洗涤液还包括不多于0.001wt%的洗涤指示剂,所述洗涤指示剂选自溴酚蓝、石绿、甲基红、甲基橙、罗丹名、溴甲酚绿、品红、二甲酚橙、二苯胺或刚果红中的一种。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述洗涤指示剂为石绿。
11.根据权利要求1所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液用于磁珠法提取血清或血浆中的核酸。
12.根据权利要求1所述的裂解液,其特征在于,所述裂解液用于在PCR检测中磁珠法提取待测样品的细胞、细菌、血清、血浆、唾液、尿液或胸腹水中的核酸。
13.一种如权利要求7所述的试剂盒的应用,其特征在于,所述试剂盒用于PCR、酶切、分子杂交、文库构建或Southern杂交过程中的核酸提取。
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