[发明专利]共表达抗EGFRvIII嵌合抗原受体和免疫检查点抑制分子的转基因淋巴细胞及其用途

权利要求书

1.一种T淋巴细胞，其特征在于，所述T淋巴细胞的细胞免疫检查点PD1被沉默；以及

表达嵌合抗原受体，其中，

所述嵌合抗原受体包括：

胞外区，所述胞外区包括单链抗体的重链可变区和轻链可变区，所述单链抗体特异性识别抗原EGFRvIII；

跨膜区，所述跨膜区与所述胞外区相连，并且嵌入到所述T淋巴细胞的细胞膜中；

胞内区，所述胞内区与所述跨膜区相连，并且所述胞内区包括CD28或4-1BB的胞内段以及CD3ζ链，

所述T淋巴细胞是通过将携带含有SEQ ID NO：136、138或139所示的核苷酸序列的慢病毒导入受体T淋巴细胞中获得的。

2.一种慢病毒，其特征在于，所述慢病毒携带含有SEQ ID NO：136、138、139任一所示的核苷酸序列。

3.一种转基因淋巴细胞，其特征在于，所述淋巴细胞细胞免疫检查点PD1被沉默；

以及表达嵌合抗原受体；

其中，所述嵌合抗原受体包括：

胞外区，所述胞外区能够与抗原特异性结合，所述胞外区包括抗体的重链可变区和轻链可变区，所述抗体为单链抗体，所述抗体结合所述抗原，所述抗原为EGFRvIII；

跨膜区；以及

胞内区，所述胞内区包括免疫共刺激分子胞内段；

所述转基因淋巴细胞是通过将权利要求2所述的慢病毒导入淋巴细胞后获得。

4.根据权利要求3所述的转基因淋巴细胞，其特征在于，所述淋巴细胞是CD3+T淋巴细胞。

5.根据权利要求3所述的转基因淋巴细胞，其特征在于，所述淋巴细胞是自然杀伤细胞。

6.根据权利要求3所述的转基因淋巴细胞，其特征在于，所述淋巴细胞是自然杀伤T细胞。

7.一种构建体，其特征在于，所述构建体包括：

第一核酸分子，所述第一核酸分子编码嵌合抗原受体；以及

第二核酸分子，所述第二核酸分子沉默细胞免疫检查点PD1，

其中，所述构建体携带含有SEQ ID NO：136、138或139所示的核苷酸序列。

8.根据权利要求7所述的构建体，其特征在于，所述构建体的载体是非致病性病毒载体。

9.根据权利要求8所述的构建体，其特征在于，所述构建体的载体是病毒载体，所述病毒载体包括选自反转录病毒载体、慢病毒载体或腺病毒相关病毒载体的至少之一。

10.一种用于治疗癌症的治疗组合物，其特征在于，包括：

权利要求7～9任一项所述的构建体、权利要求2所述的慢病毒、权利要求1所述的T淋巴细胞或者权利要求3～6任一项所述的转基因淋巴细胞。

11.根据权利要求10所述的治疗组合物，其特征在于，所述癌症包括脑胶质母细胞瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌或卵巢癌。