[发明专利]一种提取核酸的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201610023898.3 | 申请日： | 2016-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN105462961B | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 李民;周如华;石云杰;张健;王鑫;张伟;李鹏飞;毕万里;王志峰 | 申请（专利权）人： | 苏州市公安局;苏州新海生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 常亮 |
| 地址： | 215131 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提取 核酸 方法 试剂盒 | ||
1.一种提取核酸的方法，其特征在于，包括：
步骤1、向待提取样品中加入裂解液裂解释放核酸分子，然后加入吸附核酸的材料以及结合液对核酸分子进行吸附，获得核酸-吸附材料复合物；
步骤2、将核酸-吸附材料复合物洗涤后，用含有表面活性剂TritonX-100或SDS的水溶液作为洗脱液进行洗脱，收集洗脱下来的溶液，获得目标核酸分子，所述洗脱液中表面活性剂的质量百分比浓度为0.1-1％。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述裂解液为离液试剂、蛋白酶、碱、表面活性剂中的一种或两种以上。
3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述裂解液为离液试剂和蛋白酶。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述结合液包含离液试剂。
5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述结合液为离液试剂和异丙醇。
6.根据权利要求2-5任意一项所述方法，其特征在于，所述离液试剂为盐酸胍，异硫氰酸胍，碘化钠，尿素中的一种或两种以上。
7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述吸附核酸的材料为硅珠，磁珠，硅藻土或硅胶。
8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述核酸分子为DNA、RNA或两者的混合。
9.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述洗涤采用乙醇洗涤。
10.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述洗脱在50-70℃下洗脱5-20min。
11.一种提取核酸的试剂盒，其特征在于，包括：
裂解液、结合液、核酸吸附材料和洗脱液，所述洗脱液为包含表面活性剂TritonX-100或SDS的水溶液，所述洗脱液中表面活性剂的质量百分比浓度为0.1-1％。
12.根据权利要求11所述试剂盒，其特征在于，所述裂解液为离液试剂、蛋白酶、碱、表面活性剂中的一种或两种以上。
13.根据权利要求12所述试剂盒，其特征在于，所述裂解液为离液试剂和蛋白酶。
14.根据权利要求11所述试剂盒，其特征在于，所述结合液包含离液试剂。
15.根据权利要求14所述试剂盒，其特征在于，所述结合液为离液试剂和异丙醇。
16.根据权利要求12-15任意一项所述试剂盒，其特征在于，所述离液试剂为盐酸胍，异硫氰酸胍，碘化钠，尿素中的一种或两种以上。
17.根据权利要求11所述试剂盒，其特征在于，所述吸附核酸的材料为硅珠，磁珠，硅藻土或硅胶。
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