[发明专利]一种利用气相二氧化硅从人血浆中提取载脂蛋白A-1的方法有效
申请号: | 201610024664.0 | 申请日: | 2016-01-15 |
公开(公告)号: | CN105646699B | 公开(公告)日: | 2019-04-05 |
发明(设计)人: | 陶玲;杨中智;李光飞 | 申请(专利权)人: | 新乡医学院 |
主分类号: | C07K14/775 | 分类号: | C07K14/775;C07K1/22 |
代理公司: | 新乡市平原专利有限责任公司 41107 | 代理人: | 路宽 |
地址: | 453002 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 二氧化硅 血浆 提取 脂蛋白 方法 | ||
1.一种利用气相二氧化硅从人血浆中提取载脂蛋白A-1的方法,其特征在于具体步骤为:
(1)在血浆中加入气相二氧化硅并混合均匀,其中1mL血浆对应气相二氧化硅的质量为2~35mg,混合物常温静置5-100分钟;
(2)将步骤(1)得到的混合物置于离心机中在2000~14000g的条件下离心处理10分钟,收集固体沉淀物备用;
(3)将步骤(2)得到的固体沉淀物用摩尔浓度为0.5mol/L的氯化钠溶液进行洗涤,洗涤后置于离心机中在与步骤(2)相同的条件下离心处理10分钟,收集固体沉淀物备用;
(4)将步骤(3)得到的固体沉淀物用apoA1洗脱液进行洗涤,其中apoA1洗脱液为Tris-HCl摩尔浓度50mmol/L、乙醇体积浓度10%-40%和pH=7.4的混合溶液,洗涤后置于离心机中在与步骤(2)相同的条件下离心处理10分钟,离心得到的液体即为载脂蛋白A-1溶液。
2.根据权利要求1所述的利用气相二氧化硅从人血浆中提取载脂蛋白A-1的方法,其特征在于:步骤(1)中1mL血浆对应气相二氧化硅的质量为5~20mg。
3.根据权利要求1所述的利用气相二氧化硅从人血浆中提取载脂蛋白A-1的方法,其特征在于:步骤(1)中室温静置时间为40~80分钟。
4.根据权利要求1所述的利用气相二氧化硅从人血浆中提取载脂蛋白A-1的方法,其特征在于:步骤(2)中离心处理的条件为12000g。
5.根据权利要求1所述的利用气相二氧化硅从人血浆中提取载脂蛋白A-1的方法,其特征在于:步骤(4)中apoA1洗脱液为Tris-HCl摩尔浓度50mmol/L、乙醇体积浓度20%和pH=7.4的混合溶液。
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