[发明专利]花青苷调控基因PyMYB10.2及其应用在审

专利信息
申请号: 201610024864.6 申请日: 2016-01-14
公开(公告)号: CN105420248A 公开(公告)日: 2016-03-23
发明(设计)人: 冯守千;孙莎莎;陈学森 申请(专利权)人: 山东农业大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/82;A01H5/00;C12R1/19
代理公司: 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人: 吴啸寰
地址: 271018 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 花青 调控 基因 pymyb10 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种花青苷调控基因PyMYB10.2,其特征在于,所述调控基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。

2.权利要求1所述的花青苷调控基因PyMYB10.2编码的蛋白,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。

3.含有权利要求1所述基因的重组质粒。

4.如权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述质粒为pMD18-T、pBI121、pGreenII62-SK。

5.含有权利要求3或4所述重组质粒的宿主细胞。

6.权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌和农杆菌GV3101。

7.一种将权利要求1中所述基因转入烟草中的转基因方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)、提取梨总基因组DNA作为模板,以SEQIDNO:3、SEQIDNO:4所示核苷酸序列的引物进行扩增;

2)、将扩增PCR产物进行纯化并将核苷酸序列为SEQIDNO:1的基因片段定向克隆到pGreenII62-SK上,得到重组质粒;

3)、将所述重组质粒转化至农杆菌GV3101后用所述农杆菌GV3101对烟草进行侵染转化,得到转基因烟草。

8.一种将权利要求1中所述基因转入拟南芥中的转基因方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)、提取梨总基因组DNA作为模板,以SEQIDNO:3、SEQIDNO:4所示核苷酸序列的引物进行扩增;

2)、将扩增PCR产物进行纯化并将核苷酸序列为SEQIDNO:1的基因片段定向克隆到pBI121上,得到重组质粒;

3)、将所述重组质粒转化至农杆菌GV3101中,随后用所述农杆菌GV3101对拟南芥进行侵染转化,得到转基因拟南芥。

9.如权利要求8所述的转基因方法,其特征在于,步骤2)具体包括:

将扩增PCR产物进行纯化并将核苷酸序列为SEQIDNO:1的基因片段定向克隆到pMD18-T克隆载体中,对所述克隆载体进行扩增;将PyMYB10.2基因片段从克隆载体上酶切下来,连接到经过相同限制性内切酶切割的表达载体pBI121上,得到重组质粒。

10.权利要求1所述的基因在调控植物花青苷合成中的应用。

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