[发明专利]花青苷调控基因PyMYB10.2及其应用在审
申请号: | 201610024864.6 | 申请日: | 2016-01-14 |
公开(公告)号: | CN105420248A | 公开(公告)日: | 2016-03-23 |
发明(设计)人: | 冯守千;孙莎莎;陈学森 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/82;A01H5/00;C12R1/19 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴啸寰 |
地址: | 271018 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 花青 调控 基因 pymyb10 及其 应用 | ||
1.一种花青苷调控基因PyMYB10.2,其特征在于,所述调控基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。
2.权利要求1所述的花青苷调控基因PyMYB10.2编码的蛋白,其特征在于,所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。
3.含有权利要求1所述基因的重组质粒。
4.如权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述质粒为pMD18-T、pBI121、pGreenII62-SK。
5.含有权利要求3或4所述重组质粒的宿主细胞。
6.权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌和农杆菌GV3101。
7.一种将权利要求1中所述基因转入烟草中的转基因方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)、提取梨总基因组DNA作为模板,以SEQIDNO:3、SEQIDNO:4所示核苷酸序列的引物进行扩增;
2)、将扩增PCR产物进行纯化并将核苷酸序列为SEQIDNO:1的基因片段定向克隆到pGreenII62-SK上,得到重组质粒;
3)、将所述重组质粒转化至农杆菌GV3101后用所述农杆菌GV3101对烟草进行侵染转化,得到转基因烟草。
8.一种将权利要求1中所述基因转入拟南芥中的转基因方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)、提取梨总基因组DNA作为模板,以SEQIDNO:3、SEQIDNO:4所示核苷酸序列的引物进行扩增;
2)、将扩增PCR产物进行纯化并将核苷酸序列为SEQIDNO:1的基因片段定向克隆到pBI121上,得到重组质粒;
3)、将所述重组质粒转化至农杆菌GV3101中,随后用所述农杆菌GV3101对拟南芥进行侵染转化,得到转基因拟南芥。
9.如权利要求8所述的转基因方法,其特征在于,步骤2)具体包括:
将扩增PCR产物进行纯化并将核苷酸序列为SEQIDNO:1的基因片段定向克隆到pMD18-T克隆载体中,对所述克隆载体进行扩增;将PyMYB10.2基因片段从克隆载体上酶切下来,连接到经过相同限制性内切酶切割的表达载体pBI121上,得到重组质粒。
10.权利要求1所述的基因在调控植物花青苷合成中的应用。
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