[发明专利]一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法有效
申请号: | 201610030284.8 | 申请日: | 2016-01-18 |
公开(公告)号: | CN105571918B | 公开(公告)日: | 2018-04-10 |
发明(设计)人: | 张群峰;石元值;马立锋;伊晓云;刘美雅;倪康;阮建云 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院茶叶研究所 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙)33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 310008 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 生物 活性 物质 精确 定量 检测 样品 处理 方法 | ||
1.一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法,其特征在于主要包括如下步骤:
1)样品管准备:在编好号的离心管中加入提取试剂和钢珠,盖好盖子;
2)样品管第一次计重:对加入提取试剂和钢珠的离心管进行称重并记录;
3)样品管预冷:将以上装入提取试剂和钢珠的离心管放入-20℃预冷30min;
4)半定量取样:使用微量药匙取固定体积样品小心装入预冷后的样品管中;
5)精细研磨:将球磨仪适配器放入-20℃预冷30min,将样品管装入球磨仪适配器中,采用微量球磨仪进行研磨,研磨频率为30Hz,时间为30s;
6)样品管二次计重:对加入样品的样品管二次称重,并记录重量,与样品管第一次计重取差值即为样品净重;
7)微量配平:按照样品净重及固定料液比计算所需提取试剂的体积,并使用微量加液器配平每管样品的料液比;
8)震荡提取、离心、过滤、分析:根据实验要求采用超声浸提、离心、并过滤后进行分析。
2.根据权利要求1所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法,其特征在于:所述的离心管规格为2mL离心管,加入的钢珠直径为5mm,每个离心管加入2粒。
3.根据权利要求1所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法,其特征在于:步骤1)中提取试剂加入量为0.5ml。
4.根据权利要求1所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法,其特征在于:步骤4)中的微量药匙由取样器(1)和手柄(2)构成,所述的取样器(1)为中空圆筒状,上端开口,其侧壁上部设有开口槽(3),取样器的下底面设有具内螺纹的调节孔(4);取样器(1)的侧壁上设有刻度(5);所述的手柄(2)由圆形的定量片(6)和与之固定连接的调节杆(7)组成,定量片(6)位于取样器(1)的腔体内,调节杆(7)靠近的定量片(6)的一端设有与调节孔(4)相配合的调节螺纹(8),调节杆(7)另一端穿过调节孔(4)并伸出到取样器(1)的外侧。
5.根据权利要求4所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法,所述取样器(1)的内径为3 mm,长度为25 mm,调节杆(7)的直径为2 mm ,长度为100 mm,开口槽(3)的开口宽度为取样器周长的1/6,定量片(6)的直径为3 mm;调节螺纹(8)的外径等于调节孔(4)的内径,为2 mm。
6.根据权利要求1至5中任意一项所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在提取茶树新梢组织的代谢组学分析前处理上的应用。
7.根据权利要求1至5中任意一项所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在茶树新梢组织的儿茶素组分分析前处理上的应用。
8.根据权利要求6所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在提取茶树新梢组织的代谢组学分析前处理上的应用,其特征在于提取试剂为80%(重量)甲醇和1%(重量)甲酸的混合液。
9.根据权利要求7所述的一种用于生物活性物质精确定量检测的样品前处理方法在茶树新梢组织的儿茶素组分分析前处理上的应用,其特征在于提取试剂为80%(重量)甲醇和1%(重量)甲酸的混合液。
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