[发明专利]一种水产品中生物胺的快速检测方法

权利要求书

1.一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤:

（1）从水产品中萃取生物胺，并将其制备成生物胺稀溶液；

（2）在固相微萃取萃取头上浸涂一层衍生化试剂；衍生化试剂为氯甲酸异丁酯；氯甲酸异丁酯与异辛烷的重量比为0.2-1:13；

（3）用步骤（2）处理后的萃取头直接衍生/萃取步骤（1）得到的生物胺稀溶液中的生物胺，得到生物胺衍生物；

（4）将步骤（3）得到的生物胺衍生物利用气相质谱进行分析；

（5）根据内标化合物校正峰面积后，建立生物胺含量与生物胺衍生物峰面积定量关系的标准曲线；

（6）按照上述步骤（1）-（4）获得待测样品中生物胺衍生物的峰面积，根据步骤（5）生物胺含量与生物胺衍生物峰面积的定量关系，计算得到水产品中生物胺的含量。

2.根据权利要求1所述的一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（1）将萃取液得到的生物胺采用盐酸溶解，并将该溶液调节pH为9-11。

3.根据权利要求2所述的一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（1）的具体步骤为：

a将水产品匀浆后称取5-20g，用5wt%三氯乙酸提取生物胺，将提取液用5wt%的三氯乙酸稀释后滤纸过滤；

b采用正己烷对滤液进行除脂；

c向萃取液中加入氧化钠并使其浓度达到重量百分比为10% 以上，调节pH为11-12，并用1:1的正丁醇-三氯甲烷溶液萃取；

d将萃取液烘干后的残留物即生物胺用0.1M的盐酸溶解，每g水产品的盐酸使用量为1-4ml；

e盐酸溶液加入氯化钠并使其浓度达到质量百分比为5%以上，并调节pH为9-11。

4.根据权利要求1所述的一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，所述衍生试剂中还加入N,N-二乙基乙胺，N,N-二乙基乙胺与衍生化试剂的比为0.5-1:1。

5.根据权利要求1所述的一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（3）将萃取头浸入生物胺稀溶液中进行同步衍生/萃取生物胺时，在500-900rpm下搅拌30-60min；在将萃取头操作结束之后，去除萃取头上的水分。

6.根据权利要求1所述的一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（4）的具体条件是：气相色谱分析条件:岛津气相色谱仪；色谱柱:Rxi-5ms 30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度270℃，不分流模式进样；质谱接口温度280℃，离子源温度230℃；色谱柱柱温:100℃，保持1.2min；然后以10℃ /min的速度升温至160℃，再以25℃ /min的速度升温至280℃，保留5min。

7.根据权利要求1所述的一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（5）中使用的内标化合物为1,7-二氨基庚烷；标准曲线的建立采用内标法，具体为：首先，在样品中加入不同浓度的生物胺标准品和定量的内标化合物1,7-二氨基庚烷，然后，采用步骤（4）测出一系列不同浓度的生物胺标准品对应的峰面积，最后，根据内标化合物校正峰面积后，确定生物胺的含量与生物胺衍生物峰面积的定量关系，建立标准曲线。

8.根据权利要求1或2或3所述的一种水产品中生物胺的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（3）中操作前首先在生物胺稀溶液还加入5-8%的枸橼酸钠。