[发明专利]一种抗致病菌芽胞杆菌的快速筛选方法

权利要求书

1.一种抗致病菌芽胞杆菌的快速筛选方法，其特征是：

1）取1g的生腌菜，加入15mL生理盐水，水浴加热至65℃，并孵育10min，孵育结束后，温和混匀，稀释10倍，取50μＬ涂布于LB平板上，37℃培养12小时后，形成芽孢杆菌单菌落菌斑；

2）将芽孢杆菌单菌落于LB培养基液体培养3~4小时后，滴1μL于固体营养培养基平板上，37℃生长12h-14h，然后将平板倒扣于盛有5ml乙醇的培养皿盖上放置10min，移去皿盖，在通风柜中挥发乙醇15min，在固体营养培养基表面铺上培养好的指示菌悬液，均匀布满后，倾倒出多余菌液，待培养基晾干后，于37℃培养12~14h，观察比较接种点周围抑菌圈大小及透明程度，可得到抗菌效果最优的菌株。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述的指示菌悬液的配制方法：接种新鲜的致病菌指示菌单菌落于LB液体培养基，37℃，200rpm，培养12小时，得到浓度稳定的菌液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述的指示菌包括大肠杆菌K88、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、藤黄微球菌、李斯特菌、抗副溶血弧菌。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤2）得到抗菌效果最优的菌株进一步利用管碟法验证。