[发明专利]甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法

说明书

本发明涉及一种甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法，包括如下步骤：将甜叶菊干叶浸提后保留浸提液。将浸提液上样至已装填有Generik RP填料的分离柱，用以分离浸提液中的目标组分和杂质组分，上样之后的Generik RP填料中保留有目标组分，随后分别采用预处理洗脱液和目标洗脱液对目标组分进行梯度洗脱，分别得到预处理流出液和目标流出液，并保留目标流出液，预处理洗脱液为有机溶剂与水的混合液，目标洗脱液为有机溶剂与水的混合液或者有机溶剂。对目标流出液进行浓缩干燥，得到甜菊糖苷。上述甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法步骤较少，整体工艺较简单，有利于应用。

技术领域

本发明涉及天然产物提取技术领域，特别是涉及一种甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法。

背景技术

甜叶菊别名甜菊、糖草，属菊科，含有14种微量元素、32种营养成分，在体内不代谢、不蓄积、不致癌、无毒性，其安全性已经得到国际FAO和WHO以及美国FAD等组织的认可，因此它既是极好的糖源，又是良好的营养来源。

甜菊糖苷是甜叶菊中的有效成分，属于天然低热量的高倍甜味剂。它含有多种不同成分的四环二萜单体，这些单体都有相同的苷元—甜菊醇(Steviol)，可根据C13和C19位链接不同的苷元分为甜菊苷(Stevioside，以下简称St)、莱鲍迪苷A(Rebaudioside A，以下简称RA)、B(Rebaudioside B)、C(Rebaudioside C，以下简称Rc)、D(Rebaudioside D)、E(Rebaudioside E)、杜尔可苷(Dulcoside A)、斯替维伯苷(Steviolbioside)和悬钩子苷(Rubusoside)。在这些单体中，含量最高的为St(Stevioside)、RA(Rebaudioside A)和Rc(Rebaudioside C)，分别占叶片干重的5％～9.5％、2％～4.5％和1％～2％，甜度分别为蔗糖的300、450和120倍。由于甜菊糖苷具有上述高甜度、低热量的特性，长期食用不会使人发胖，因此，目前甜菊糖苷已作为一种甜味剂替代蔗糖，它是继蔗糖甜菜糖之外，第三种具有开发价值和健康推崇的天然替代品。我过卫生部自1985年和1990年分别批准甜菊糖苷为不限量使用的天然甜味剂和医药用甜味剂辅料。因此，甜菊糖苷有着广泛的应用范围和宽阔的市场前景。

然而，传统的甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法为将甜叶菊干叶通过浸提、过滤、超滤，然后加硫酸亚铁、石灰乳得上清液，反复通过树脂，最终干燥得甜菊糖苷。步骤较多，整体工艺繁琐，不利于应用。

发明内容

基于此，有必要针对传统的甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法中整体工艺繁琐的问题，提供一种工艺简单的甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法。

一种甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法，包括如下步骤：

将甜叶菊干叶浸提后保留浸提液；

将所述浸提液上样至已装填有Generik RP填料的分离柱，用以分离所述浸提液中的目标组分和杂质组分，上样之后的所述Generik RP填料中保留有所述目标组分，随后分别采用预处理洗脱液和目标洗脱液对所述目标组分进行梯度洗脱，分别得到预处理流出液和目标流出液，并保留目标流出液，所述预处理洗脱液为有机溶剂与水的混合液，所述目标洗脱液为有机溶剂与水的混合液或者有机溶剂；以及

对所述目标流出液进行浓缩干燥，得到甜菊糖苷。

与传统的甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法相比，上述甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化方法中，只需将浸提液上样至分离柱，然后进行洗脱并保留目标流出液，之后进行浓缩干燥即可得到甜菊糖苷。无需添加硫酸亚铁、石灰乳等，也不需反复通过树脂，因此，步骤较少，整体工艺较简单，有利于应用。

在其中一个实施例中，所述分离柱为固相萃取柱、快速色谱柱或液相色谱柱。

在其中一个实施例中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮或乙腈。