[发明专利]一株紫孢菌新菌株F1及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物新菌株及其应用，具体的说是一株紫孢菌新菌株及其在吸附重金属方面的应用。

背景技术

水是生命之源，3月22日是联合国确定的“世界水日”。2015年，联合国发表的《世界水资源开发报告》中指出，当今世界面临着水资源危机的共同挑战，水一旦受到污染，就不能用于饮用、洗浴、工业或农业用途。水质不佳会损害人体健康，导致生态系统的服务功能退化。我国是世界上水资源污染比较严重的国家，尤其是重金属的积累，已经成为水污染的重要因素之一。

目前国内外已经出现了很多种清除水中重金属的方法，如化学修复法，活性炭吸附法和离子交换法等，这些方法虽然吸附效果很好，但是成本高，容易造成二次污染，不能彻底解决水资源再生利用问题。近年来，生物吸附技术越来越引起各国研究人员的重视，研究结果表明酵母菌、霉菌、细菌和藻类等具有较强的吸附重金属的能力。

霉菌在工业生产中是非常重要的一类微生物，它作为生物吸附剂具有很多优势：来源广泛，容易培养，价格低廉；操作简单，易于工业化；细菌制备吸附剂时，菌种扩大培养后必须通过大量离心收集生物量，操作麻烦。霉菌在扩大培养时，形成均匀的菌丝球且生物量高，易于收集。

目前，对霉菌作为吸附剂的研究主要集中在青霉菌(Penicillium.sp)，毛霉菌(Mucor.sp)，根霉菌(Rhizopus.sp)，曲霉菌(Aspergillus.sp)和木霉(Trichoderma.sp)等，湖南省农业生物技术研究中心发明的一种耐镉青霉菌(专利号CN104805021A)，陈雯莉等发明的一种高吸附镉的丝状真菌淡紫拟青霉(专利号CN103451103A)，马晨晨等利用橘绿木霉处理含Cr⁶⁺的水体，证明橘绿木霉对受污染水体有修复作用(专利号CN103740596A)。

目前，对于紫孢菌的研究在我国仅仅看到有关于紫孢菌防治线虫和害虫的报道，而对利用紫孢菌作为重金属吸附剂的研究还未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株紫孢菌新菌株F1，该菌株高度耐受重金属Cd²⁺，其菌

体可以大量吸附重金属Cd²⁺，在处理重金属污染水体中具有良好的应用前景。

本发明菌株是从山西省太原市杨家堡污水处理厂污水过滤后的淤泥中分离得到的紫孢菌新菌株，该菌株已于2015年12月17日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为紫孢菌，拉丁文学名为，Purpureocilliumsp，保藏号为，CGMCCNo.11813。

本发明的紫孢菌新菌株是一株属于子囊菌亚门，粪壳菌纲，肉座菌目，形虫草科，紫孢菌属的真菌，是一株首次发现的具有高耐受重金属的霉菌，本发明丰富了微生物作为吸附剂的种质资源。

本发明的紫孢菌新菌株F1具体是通过如下方法分离获得的：

(1)取太原市杨家堡污水处理厂污水过滤后的淤泥，装入自封袋，在实验室自然晾干。

(2)耐重金属Cd²⁺的紫孢菌新菌株F1诱捕分离：在100mL含有浓度为2mmol/LCd²⁺的PB液体培养基(土豆200g切块加水煮沸20min，过滤取滤液加入葡萄糖20g，定容至1000mL，121℃高压灭菌20min)上，加入1g晾干后的淤泥置于摇床中，在30℃，180r/min的条件下振荡培养3天，得到悬浮液。

(3)取步骤(2)中的悬浮液做浓度梯度稀释至10^-7，吸取10^-5、10^-6、10^-7的菌悬浮液各150μl涂布于含Cd²⁺的PDA(土豆200g切块加水煮沸20min，过滤取滤液加入葡萄糖20g，琼脂粉15g，定容至1000mL，121℃高压灭菌20min)平板中，倒置于30℃培养箱中培养，平板上长出明显的白色菌落。

紫孢菌新菌株F1的筛选：

(1)待初筛平板中菌落长出后，挑取白色菌落的菌株转接入PB液体培养基(加入2mmol/LCd²⁺)，在30℃，180r/min的摇床中培养3-5天。

(2)取上述培养的菌悬浮液涂布在PDA平板上，30℃培养箱培养3-5天至长出单菌落，然后将单菌落保存在PDA试管斜面上得到纯培养的菌株，命名为F1。