[发明专利]肺癌特异性转录调控元件的筛选方法在审
申请号: | 201610040342.5 | 申请日: | 2016-01-21 |
公开(公告)号: | CN105506062A | 公开(公告)日: | 2016-04-20 |
发明(设计)人: | 许瑞安;李文茂;高燕;吴雅清;蔡双凤;崔秀灵 | 申请(专利权)人: | 华侨大学 |
主分类号: | C12Q1/66 | 分类号: | C12Q1/66 |
代理公司: | 泉州市文华专利代理有限公司 35205 | 代理人: | 戴中生 |
地址: | 362000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肺癌 特异性 转录 调控 元件 筛选 方法 | ||
1.一种肺癌特异性转录调控元件的筛选方法,其特征在于:通过UCSC数据库获取非小 细胞肺癌A549细胞中DKK1基因位点周围27kb长区域的表观遗传信息,对获得的表观遗传信 息进行分析预测得到12条候选增强子转录调控元件片段,接着将这12条选增强子转录调控 元件片段分别插入到DKK1近端启动子上游,成功构建荧光素酶重组质粒;所得荧光素酶重 组质粒分别转染到非小细胞肺癌A549细胞、非小细胞肺癌H460细胞、小细胞肺癌H446细胞、 食道癌Eca-109细胞、正常肝细胞Changliver和人胚肾细胞HEK293,并通过双荧光素酶报 告基因检测系统检验相关候选元件活性,筛选到对DKK1启动子具有较高的增强表达作用的 调控元件即所述肺癌特异性转录调控元件。
2.根据权利要求1所述的肺癌特异性转录调控元件的筛选方法,其特征在于:所述表观 遗传信息为DNaseI超敏性、组蛋白修饰与P300结合位点。
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