[发明专利]一种带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法

权利要求书

1.一种带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法，其特征在于,包括以下 步骤：

S1、准备载玻片，使其表面功能化以修饰上可在溶液中电离的基团， 所述基团在溶液相中所电离出的电荷与待测带电微纳米颗粒所带电荷的电 性相反；

S2、将带电微纳米颗粒的溶液滴在功能化的所述载波片上，溶液中的 带电微纳米颗粒受到所述功能基团所电离出的异性电荷的相互吸引作用而 被吸附于溶液滴落点与功能化的所述载玻片的交界面上，形成微纳米颗粒 的富集区域；

S3、将盖玻片置于所述载玻片的溶液滴落上方，施加一定压力使溶液 向四周均匀扩散，制成载玻片样本；

S4、依据带电微纳米颗粒的种类，利用适当的显微镜在所述载玻片样 本上找到带电微纳米颗粒的富集区域，用相机拍摄并统计其中单位面积的 带电微纳米颗粒的个数，基于所得的统计结果测定出带电微纳米颗粒的浓 度。

2.如权利要求1所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法，其特 征在于,步骤S2中，将1-10微升的带电微纳米颗粒的溶液滴在功能化的 所述载波片上1-10分钟。

3.如权利要求1或2所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法， 其特征在于,所述带电微纳米颗粒为在暗场下可观察计数的贵金属微纳米 颗粒，步骤S4中，使用暗场显微镜找到所述带电微纳米颗粒的富集区域， 用相机拍摄并统计其中单位面积的带电微纳米颗粒的个数，进而确定富集 区域内总的带电微纳米颗粒个数。

4.如权利要求1或2所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法， 其特征在于,所述带电微纳米颗粒为在荧光显微镜下可观察计数的荧光 微纳米球或者上转换荧光微纳米晶，步骤S4中，使用荧光显微镜找到所 述带电微纳米颗粒的富集区域，用相机拍摄并统计其中单位面积的带电微 纳米颗粒个数，进而确定富集区域内总的带电微纳米颗粒个数。

5.如权利要求1或2所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法， 其特征在于,所述带电微纳米颗粒为带正电或带负电的微纳米颗粒；优选 地，对于带负电的微纳米颗粒，步骤S1中，在载玻片上修饰带正电的氨 基基团。

6.如权利要求1或2所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法， 其特征在于,所述带电微纳米颗粒为表面功能化偶联有DNA磷酸基团的金 微纳米棒，步骤S1包括以下步骤：

S11、将所述载玻片浸泡于浓硫酸与双氧水体的混合溶液中一段时间， 再经过去离子水冲洗和超声处理后烘干；

S12、将烘干后的载玻片浸泡于氨丙基三乙氧基硅烷的醇溶液中一段 时间，再经过去离子水冲洗后烘干。

7.如权利要求6所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法，其特 征在于,步骤S11中，将所述载玻片浸泡于浓硫酸与30％双氧水体积比为 3：1的溶液中1到2个小时。

8.如权利要求6或7所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测方法， 其特征在于,步骤S12中，将所述载玻片浸泡于5-30％的氨丙基三乙氧基 硅烷的醇溶液中1小时。

9.如权利要求6至8任一项所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测 方法，其特征在于,步骤S2中，将金微纳米棒溶液滴在经步骤S1处理的 载玻片上，静置3-5分钟。

10.如权利要求6至9任一项所述的带电微纳米颗粒的超低浓度探测 方法，其特征在于,步骤S4中，使用暗场显微镜找到在视野中显现出红色 的金微纳米棒的富集区域的边界，统计该富集区域内出现的全部红色亮 点，基于所得的统计结果测定出溶液中修饰有DNA磷酸基团的金微纳米棒 数目。