[发明专利]一种稳定和延续地衣芽胞杆菌甘露聚糖酶活的方法有效
申请号: | 201610046416.6 | 申请日: | 2016-01-25 |
公开(公告)号: | CN105483109B | 公开(公告)日: | 2019-03-22 |
发明(设计)人: | 葛菁萍;杜仁鹏;平文祥;赵丹;金曼 | 申请(专利权)人: | 黑龙江大学 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08;C12N9/42;C12R1/10 |
代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 朗坚 |
地址: | 150080 黑龙江省*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘露聚糖酶 菌体 发酵 地衣芽胞杆菌 菌体固定化 高产菌株 聚乙烯醇 投入生产 固定化 包埋 研究 | ||
1.一种地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其包括如下步骤:
1)菌体的固定;
2)菌体的发酵;
其中所述的地衣芽胞杆菌菌体的固定是将地衣芽胞杆菌进行聚乙烯醇包埋固定;
所述聚乙烯醇浓度为4%,菌胶比为1:1;
步骤(1)中的聚乙烯醇包埋固定是将冷却至37℃灭菌后的聚乙烯醇溶液,与菌体迅速混匀,铺平板,冷冻至-20℃放置固定,反复冻融三次后,冻融方法为冷冻24h后取出平板,室温下溶解30min再冷冻24h,切成小块,再用无菌生理盐水冲洗,即得到固定化细胞。
2.根据权利要求1所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中菌体的发酵是以0.1%-1.5%的魔芋粉加入量,将1-10%的固定化菌体接入100mL/250mL魔芋粉发酵培养基,摇床振荡增殖、发酵。
3.根据权利要求2所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中菌体的发酵魔芋粉加入量是0.5-1.0%。
4.根据权利要求2所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中菌体的发酵魔芋粉加入量是0.7%。
5.根据权利要求1-4任一项所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中增殖时间为10-100h,发酵时间为20-50h。
6.根据权利要求1-4任一项所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中增殖时间为30-90h,发酵时间为25-40h。
7.根据权利要求1-4任一项所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中增殖时间为60h,发酵时间为32h。
8.根据权利要求1-4任一项所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中的发酵次数为1次以上。
9.根据权利要求1-4任一项所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中的发酵次数为3次以上。
10.根据权利要求1-4任一项所述的地衣芽胞杆菌菌株的固定化发酵方法,其特征在于,其中,步骤2)中的发酵次数为6次。
11.一种提高地衣芽胞杆菌菌株产β-甘露聚糖酶酶活力的固定化方法,其特征在于,将地衣芽胞杆菌以权利要求1-10任一项所述的固定化方法进行固定。
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