[发明专利]P70s6k1及其干扰序列在制备逆转非小细胞肺癌对吉非替尼耐药药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程领域，特别涉及P70s6k1干扰序列在制备逆转非小细胞肺癌对吉非替尼耐药药物中的应用。

背景技术

肺癌是目前世界上罹患癌症的男性和女性中导致死亡的最主要的病因，非小细胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)占据了所有肺癌患者的85％。目前在全球范内非小细胞肺癌每年的新增病例及死亡人数都在不断的攀升，也广大的医务工作人员也带来了严峻的考验。而治愈性的手术切除通常只适用于早期发病。各种分期的肺癌五年生存率只有15％。对于检查出的疾病为局限期的患者来说，生存率也仅为49％，这说明，即使是早期的诊断，该疾病的复发和死亡也是很普遍的，因此，为肺癌患者寻找新的治疗方法十分关键。

吉非替尼是一种可逆性小分子酪氨酸激酶抑制剂，结构与ATP类似，通过与ATP竞争可逆性的与EGFR结合，达到阻断其下游信号通路的目的，目前已经被多个国家批准用于治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)。酪氨酸激酶催化下游分子磷酸化，随即启动一系列下游的信号通路，包括PLCγ、PI3K、小的G蛋白、P21ras、rasGTP酶激活蛋白(GAP)、生长因子受体结合蛋白2(grb2)和src激酶家族等。其中研究较明确的主要有两条途径：一条是ras/erk/MAPK途径。另一条是PI3K-AKT-PKC-IKK途径，导致NFκB移位至核内，而将信息传递入细胞核。EGFR活化后经过上述信号传导途径最终引起一系列相关基因活化，导致肿瘤细胞持续增殖，凋亡抑制，以及包括血管形成因子在内的多种细胞因子合成，促使肿瘤细胞转移并导致放化疗抗拒。对于EGFR突变型的非小细胞肺癌患者有着较高的有效率，并且由于其毒性反应低，耐受性良好已经成为非小细胞肺癌治疗最有力武器之一，但是多数患者在使用吉非替尼一段时间后(通常为8-10个月)会出现疾病再次进展，根本原因是由于肿瘤细胞由于长期暴露于吉非替尼后产生了对吉非替尼的获得性耐药，目前已知的两种肺癌吉非替尼获得性耐药的重要机制是“EGFR 19外显子缺失且发生T790M突变或其他继发性突变”和“Met扩增旁路激活通路”，但这两种机制尚不足以完全解释EGFR-TKI获得性耐药，仍有大约30％左右的患者产生吉非替尼获得性耐药但仍机制不明。因此探索除EGFR突变状态外的其它吉非替尼耐药机制，逆转肺癌细胞对吉非替尼的耐药显得尤为重要。

P70s6k1(ribosomalprotein S6kinase，polypeptie1)是mTOR下游的一个重要信号分子，可以参与调节细胞生长、分化增殖以及蛋白质合成等过程。P70s6k1的激活可以通过磷酸化S6核糖体蛋白，促进细胞增殖及蛋白质合成。mTOR/P70s6k1与细胞内其他相关信号蛋白相互作用在肥胖和IR发生过程中起着重要作用，我们前期的研究发现，mTOR/P70s6k1信号通路的上游：PI3K/AKT的激活与吉非替尼的耐药密切相关，但是关于P70s6k1与肺癌耐药特别是吉非替尼耐药关系目前无人报道，因此阐明P70s6k1与吉非替尼耐药的关系并尝试针对P70s6k1开发逆转耐药的方法将为克服临床治疗中吉非替尼耐药提供新的依据。

发明人进行进一步研究在国际范围内首次发现P70s6k1蛋白的表达水平EGFR-TKI耐药密切相关，通过设计P70s6k1特异性的干扰序列下调肺癌细胞中P70s6k1蛋白的表达水平可以部分逆转肺癌细胞对吉非替尼的耐药性，为制备逆转非小细胞肺癌对吉非替尼耐药药物提供基础和实验依据。

发明内容

发明目的

本发明的目的是提供P70s6k1干扰序列在制备逆转非小细胞肺癌对吉非替尼耐药药物中的应用。

P70s6k1在制备预防或治疗逆转非小细胞肺癌对吉非替尼耐药药物中应用，其中所述的P70s6k1的氨基酸序列为：

MRRRRRRDGYADRDRADMAGVDDDDAGSDGGNSMDHGGVGYGMHCKSTSVNRGKRCRVGKGGYGKAMVRNAKDTAHTKARNVKHVDYATGGKYYSGGMRGMDTACYASMAGHHKGYRDKNMNHGHVKTDGCKSHDGTVTHTCGTYMAMRSGHNRAVDWWSGAMYDMTGATGNRKKTDKKCKNYTARDKKKRNAASRGAGGDAGVAHRHNWARKVKSDVSDSKTRTVDSDDSTSSANVGTYVASVSVKKSKRSRRGSRTVSVKSGDWGRGASASTANTVYMTSGMDVTMSGASARNSGYKKAMSKRHRMNL，见SEQ ID NO：1。。