[发明专利]一种淡紫拟青霉的液体发酵方法

说明书

本发明提供一种淡紫拟青霉液体发酵方法，包括菌种活化、菌种扩培和发酵步骤。所述发酵步骤：采用的发酵培养基包括以下原料组分：棉籽饼粉、硅藻土、酵母浸出粉、红薯粉、白砂糖、鱼蛋白胨、橄榄油、甘露醇、硫酸镁、硫酸铜、吐温20、磷酸氢钙、硼酸、牛胆盐、酪氨酸、二氧化锰、去离子水。所述菌种活化步骤：采用的菌种活化培养基包括以下原料组分：海藻多糖、山梨糖醇、牛肉膏、天门冬酰胺、七水硫酸铜、二氧化锰、氯化钠、氯化钙、硼酸、柠檬酸铁、甘露醇、琼脂、去离子水。本发明制备的淡紫拟青霉发酵液，孢子含量为4.1×10⁹～4.4×10⁹个/g。

技术领域

本发明涉及一种淡紫拟青霉的发酵方法，具体的涉及一种淡紫拟青霉液体发酵方法，属于农业技术领域。

背景技术

淡紫拟青霉属于内寄生性真菌，是一些植物寄生线虫的重要天敌，能够寄生于卵，也能侵染幼虫和雌虫，可明显减轻多种作物根结线虫、胞囊线虫、茎线虫等植物线虫病的危害。该属主要特征是分生孢子梗呈瓶状或近球形(瓶梗),在菌丝端或短枝上轮生,分生孢子单孢链状,至今该属报道有近50个种,皆为昆虫病原菌和线虫病原菌。

淡紫拟青霉广泛分布于世界各地，具有功效高、寄主广、易培养等优点，特别在控制植物病原线虫方面功效卓著。半个多世纪以来，国内外许多专家学者对此菌进行了广泛而深入的研究，在生物学、生态学、大量培养、控害效能与田间应用等方面取得了一系列研究成果。

但对淡紫拟青霉的发酵方法研究还不是非常成熟，实验室的培养方法，在实际生产中并不能同比例放大，在工业生产中发酵液的菌含量等指标明显降低，无法大规模生产。

专利CN201110274968.X公开了一种淡紫拟青霉的液体发酵培养方法，但其制备的淡紫拟青霉发酵液的孢子、菌体的含量都不高，且其采用的培养方法为摇床培养，并不适用于大规模的工业生产。

现有的淡紫拟青霉液体发酵技术具有以下缺陷：（1）淡紫拟青霉发酵液的孢子含量低；（2）淡紫拟青霉发酵液的孢子萌发率较差；（3）淡紫拟青霉发酵液的菌体含量不高；（4）制备的淡紫拟青霉防治植物病虫害的效果不理想。

发明内容

本发明为解决现有技术存在的不足，提供一种淡紫拟青霉液体发酵方法，以实现以下发明目的：

1、提高淡紫拟青霉发酵液的孢子含量，使孢子含量为4.1×10⁹～4.4×10⁹个/g；

2、提高淡紫拟青霉发酵液的孢子萌发率，使孢子萌发率为98.9～99.5%；

3、提高淡紫拟青霉发酵液的菌体含量，使菌体含量为89～96 g/L；

4、使本发明制备的淡紫拟青霉对荔枝蝽蟓、大豆孢囊线虫、蓟马、褐飞虱具有明显的防效；

5、使本发明制备的淡紫拟青霉具有明显的抑制玉米小斑病、小麦赤霉病、黄瓜炭疽病菌、棉花枯萎病的作用。

为解决上述技术问题，采用以下技术方案：

一种淡紫拟青霉液体发酵方法，所述的发酵方法包括菌种活化、菌种扩培和发酵步骤。

以下是对上述技术方案的进一步改进：

所述发酵步骤：采用的发酵培养基包括以下原料组分：棉籽饼粉、硅藻土、酵母浸出粉、红薯粉、白砂糖、鱼蛋白胨、橄榄油、甘露醇、硫酸镁、硫酸铜、吐温20、磷酸氢钙、硼酸、牛胆盐、酪氨酸、二氧化锰、去离子水 。

所述发酵培养基的原料重量份配比为：