[发明专利]一种几丁聚糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种几丁聚糖的制备方法，属于降解技术领域。

背景技术

几丁聚糖在食品、医药、农业种子、日用化工、工业废水处理等行业均有应用。目前，壳寡糖发现具有提高免疫、活化细胞、预防癌症、降血脂、降血压、抗衰老，调节机体环境等作用，可用于医药、保健、食品领域。在环保领域壳聚糖可用于污水处理，蛋白回收，水净化等。功能材料领域，壳聚糖可用于膜材料、载体、吸附剂、纤维、医用材料等。轻纺领域，壳聚糖可用于织物整理、保健内衣、造纸助剂等。农业领域可应用于饲料添加、种子处理、土壤改良、水果保鲜等。

由于其分子结构中大量游离氨的存在，溶解性能好，具有一些独特的物化性质及生理功能，在农业、医药、食品、化妆品、环保诸方面具有广阔的应用前景。

由于提取技术的水平有限，很多几丁聚糖被浪费，所以几丁聚糖的提取制备技术一直被人们所重视，是研究的一个重要方向。

现有技术具有以下缺陷：

（1）制备几丁聚糖的提取率低；（2）制备几丁聚糖的产率较低纯度不高；（3）现有技术制备的几丁聚糖分子量高、分散度大；（4）对植物病毒病和细菌病的防治效果不明显；（5）制备成本高。

发明内容

本发明为解决现有技术存在的不足，提供一种几丁聚糖的制备方法，以实现以下发明目的：

1、提高制备几丁聚糖的提取率；

2、提高制备的几丁聚糖的纯度；

3、解决现有技术制备的几丁聚糖分子量高、分散度大的问题；

4、提高几丁聚糖对植物病毒病和细菌病的抑制作用；

5、降低几丁聚糖的制备成本。

为解决上述技术问题，采用以下技术方案：

一种几丁聚糖的制备方法，所述的制备方法包括材料准备、微波处理、酶处理、甲壳素抽提、脱乙酰化、层析、制得成品步骤。

以下是对上述技术方案的进一步改进：

所述的微波处理：微波频率为910～960Hz，微波处理时间为20～30分钟。

所述的酶处理步骤依次进行以下酶处理：先向锥形瓶内加入γ-淀粉酶，加热至30～35℃，反应2h；再向锥形瓶内加入羧肽酶，加热至35～38℃，反应1h；再向锥形瓶内加入葡聚糖内切酶，加热至35～38℃，反应0.5h。

所述的甲壳素抽提包括沸水抽提40～50min。

所述的甲壳素抽提还包括醋酸溶液30～35℃条件下抽提2h，所述醋酸溶液的浓度为0.06～0.12 mol/L。

所述的甲壳素抽提还包括用NaOH溶液煮沸1h，所述NaOH溶液的浓度为0.85～1.12mol/L。

所述的脱乙酰化：向甲壳素中加入41～43%的氢氧化钠溶液， 120rpm搅拌14～16小时，控制反应温度为94～96℃。

所述的层析：采用的分离介质为交联葡聚糖离子交换剂。

所述的层析：洗脱液为0.04～0.07mol/L的碳酸氢钠溶液。

所述的层析：洗脱体积为层析柱体积的25倍，洗脱梯度为0.3mol/L～0.8mol/L，控制流速为0.45～0.55mL/min。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、本发明方法制备几丁聚糖的提取率高，提取率为67.8～87.9%；

2、本发明方法制备的几丁聚糖纯度高，纯度为88.2～99.1%；

3、本发明方法制备的几丁聚糖分子量低，分散度小；平均分子量可达1201 Da，分散度可达1.22；

4、本发明制备的几丁聚糖对辣椒卷叶病毒、花叶病毒、番茄卷叶病毒、苹果花脸病毒均有明显的抑制作用；

5、本发明制备的几丁聚糖可明显降低植物细菌病的发病率；

6、本发明制备几丁聚糖的方法，成本低，可降低成本45～55%。

具体实施方式

实施例1 一种几丁聚糖的制备方法

步骤1、材料准备

将白丁虾虾壳除去肉质及其他杂质，收集；用清水洗剂干净后，80℃干燥40分钟；冷却至常温后，取1kg贝壳，粉碎为200目的虾壳粉，备用。

步骤2、微波处理

将虾壳粉放入微波设备中，微波处理25分钟。

步骤3、酶处理

将微波处理后的虾壳粉置于锥形瓶内；

向锥形瓶内加入质量含量18%的酒石酸，调节溶液pH为5.8；

先向锥形瓶内加入淀粉酶2g，将锥形瓶置于水浴中加热至32℃，反应2h；