[发明专利]一种高效生产根霉曲的工艺在审
申请号: | 201610050328.3 | 申请日: | 2016-01-26 |
公开(公告)号: | CN105462861A | 公开(公告)日: | 2016-04-06 |
发明(设计)人: | 季家举;谢元 | 申请(专利权)人: | 湖南澳深生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/845 |
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地址: | 413000 湖南省益阳*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 生产 根霉曲 工艺 | ||
1.一种高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,通过四级培养得到根霉曲,各级种子所采用的培养基各不相同:一级试管种采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基;二级摇瓶种采用麦芽汁液体培养基;三级发酵罐种采用马铃薯-蔗糖液体培养基;四级生产种采用大米麦麸培养基。
2.根据权利要求1所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述大米麦麸培养基中米粉与麦麸的比例为24:1,所述米粉为大米磨粉,过40目筛。
3.根据权利要求1所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述一级试管种采用如下方法培养:配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基;于115℃灭菌25min,分装至已灭菌的试管中,制成试管斜面培养基;挑取已活化的根霉菌接种于试管斜面,30℃恒温培养48h得一级试管种。
4.根据权利要求3所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配制方法为:选新鲜无霉变马铃薯,去皮、切块,温火熬制后过滤,补水并加入葡萄糖和琼脂粉,搅拌均匀,最终重量比为马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂粉2%。
5.根据权利要求1所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述二级摇瓶种采用如下方法获得:配制麦芽糖液体培养基,115℃高压灭菌15min,冷却后,无菌环境下将一级试管种接种于三角瓶中,恒温摇床培养36h,其中温度30℃、转速80rpm/min,得二级摇瓶种。
6.根据权利要求1所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述三级发酵罐种采用如下方法获得:配制马铃薯-蔗糖液体培养基加入发酵罐中,121℃灭菌20min,在无菌环境下用灭过菌的搅拌机将二级摇瓶种搅碎,通过无菌操作按8%的接种量接入以冷却的发酵罐中,同时加入青霉素至50μg/mL,28-32℃下发酵罐培养36h,培养过程中监测pH值变化。
7.根据权利要求6所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述马铃薯-蔗糖液体培养基采用如下方法配制:挑选新鲜无霉变马铃薯,去皮后切成小块倒入夹层锅中,加入5倍体积的水,熬制40-60min后,用滤布过滤,补水至5倍体积,搅拌均匀得新鲜土豆汁;将新鲜土豆汁加入发酵罐种中,同时加入2%的蔗糖和0.5‰的消泡剂。
8.根据权利要求7所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述发酵罐培养的具体条件为:发酵罐搅拌转速200r/min,罐压0.8-1.2kg/cm2,通风量0.4V/V·min。
9.根据权利要求2所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,所述四级生产种采用如下方法获得:配制大米麦麸培养基,放入灭菌锅干蒸1h后拿出冷却,当大米麦麸培养基冷却至50℃时加入35%质量分数的新鲜纯净水,搅拌均匀;将培养好的三级种从发酵罐中放出,用灭过菌的搅拌机将菌丝体搅碎,按10%的比例接种于上述大米麦麸培养基中,搅拌均匀后,送至已消毒过的发酵房以温度30℃、湿度60%的条件恒温恒湿培养36h。
10.根据权利要求9所述的高效生产根霉曲的工艺,其特征在于,还包括成曲烘干步骤,将四级生产种放入烘房,40-45℃,排湿烘干30-36h,水分含量降至8-10%时得到根霉曲。
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