[发明专利]酶标板包被液、封闭液及酶标板制作方法有效

专利信息
申请号: 201610050872.8 申请日: 2016-01-26
公开(公告)号: CN105588937B 公开(公告)日: 2017-10-10
发明(设计)人: 危林丹;韩敏;余春湖 申请(专利权)人: 上海馥地检测技术有限公司
主分类号: G01N33/543 分类号: G01N33/543;G01N21/31
代理公司: 上海领洋专利代理事务所(普通合伙)31292 代理人: 罗晓鹏,邱江霞
地址: 201112 上海市闵*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 酶标板 包被 封闭 制作方法
【权利要求书】:

1.含有pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的试剂在制备酶标板包被液中的用途,所述包被液溶解待包被的抗原或抗体,并用于所述抗原或抗体的包被,且所述包被液与含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20、BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的封闭液配合使用。

2.如权利要求1所述含有pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的试剂在制备酶标板包被液中的用途,其特征在于:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的酶活性为50-500UI/MG。

3.如权利要求2所述含有pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的试剂在制备酶标板包被液中的用途,其特征在于:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度为5~50μg/L。

4.如权利要求3所述的含有pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的试剂在制备酶标板包被液中的用途,其特征在于:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度为15~35μg/L。

5.如权利要求4所述含有pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的试剂在制备酶标板包被液中的用途,其特征在于:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度为20~30μg/L。

6.如权利要求5所述含有pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的试剂在制备酶标板包被液中的用途,其特征在于:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的浓度为25μg/L。

7.含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20、BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的试剂在制备酶标板封闭液中的用途,所述封闭液与含有pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的的包被液配合使用。

8.如权利要求7所述含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20和BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的试剂在制备酶标板封闭液中的用途,其特征在于:氧化型辅酶的浓度为0.1~1mmol/L;6-磷酸葡萄糖的浓度为0.05~1mmol/L。

9.如权利要求8所述含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20和BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的试剂在制备酶标板封闭液中的用途,其特征在于:氧化型辅酶的浓度为0.15~0.5mol/L;6-磷酸葡萄糖的浓度为0.08~0.4mmol/L。

10.如权利要求9所述含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20和BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的试剂在制备酶标板封闭液中的用途,其特征在于:氧化型辅酶的浓度为0.2~0.4mol/L;6-磷酸葡萄糖的浓度为0.1mmol/L。

11.如权利要求7所述含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20和BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的试剂在制备酶标板封闭液中的用途,其特征在于:吐温-20的体积分数为0.05%;BSA的浓度为0.5~5g/L。

12.如权利要求11所述的含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20和BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的试剂在制备酶标板封闭液中的用途,其特征在于:BSA的浓度为0.5~1g/L。

13.如权利要求12所述的含有pH=8.0的磷酸盐缓冲溶液、吐温-20和BSA、氧化型辅酶和6-磷酸葡萄糖的试剂在制备酶标板封闭液中的用途,其特征在于:BSA的浓度为0.5g/L。

14.一种预包被酶标板的制作方法,其包括步骤:

1)用权利要求1~6任一项所述的酶标板包被液溶解待包被的抗体或抗原;

2)步骤1)得到的酶标板包被液加入待包被的酶标板的各个微孔中,4℃~37℃包被2~10小时;

3)所述酶标板用洗涤液洗2~5次,并拍干;

4)向所述酶标板的各个微孔中加入权利要求7~13任一项所述的酶标板封闭液,37℃封闭1~2小时,然后弃去封闭液、拍干、烘干;

步骤4)中加入酶标板封闭液0.5~2小时后检测所述酶标板的包被均一度。

15.如权利要求14所述的预包被酶标板的制作方法,其特征在于,步骤3)中所述酶标板用洗涤液洗2—3次,并拍干。

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