[发明专利]用于检测胃癌相关代谢小分子的液质联用模型及制备方法

说明书

技术领域

本发明属于代谢小分子检测领域，特别涉及对胃癌相关代谢小分子的液质联用 检测模型及其制备方法和应用。

背景技术

胃癌是我国发病率较高的癌症之一，胃癌病人多数无明显症状，少数人有 恶心、呕吐或溃疡类似病症的上消化道疾病的症状。胃癌的发病具有地域性。 研究发现，亚洲地区，如中国、日本、韩国等具有较高的发病率。其次，胃癌 的发病原因较为复杂，目前，已经报道的研究发现，胃癌的诱因与日常饮食因 素、胃溃疡疾病、胃息肉疾病以及幽门螺旋杆菌感染有关。根据最新的2012 年的统计，我国胃癌发病率为3.314人/万人，死亡率为每万人2.434人/万人， 远远高于世界上其他国家(发病率为2.309人/万人，死亡率为1.639人/万人)， 位居恶性肿瘤第2位。通过不断的研究发现，提高胃癌诊断效果从而提高胃癌 病人五年生存率的根本策略是对胃癌的诊断，达到早发现早治疗的目的。对于 胃癌的诊断，开展较好的国家，如日本，其胃癌诊断的比例已经超过全部诊断 胃癌病例的一半以上，而我国对于胃癌的诊断仅为全部胃癌诊断病例的5-15％。 胃癌在诊断以后进行治疗，病患的五年生存率可以达到90％，原因超过进展期 胃癌的治疗效果(五年生存率仅为16.6％)。目前，对于胃癌的诊断方法，主 要集中在内窥镜手段、影像学诊断和分子生物学诊断。其中，影像学手段包括 钡餐造影、螺旋CT成像；分子生物学手段即使对与癌症相关的基因、蛋白质 的标志物进行筛查，例如，张力蛋白同源磷酸酶基因、survivin基因、Livin基 因、CA72-4蛋白、CA19-9蛋白等。钡餐造影、内窥胃镜的方法，对于胃癌的 诊断准确率较高，但是由于这些方法检测过程复杂，对病人的在生理上造成一 定的伤害；对与基因和蛋白质标志物的筛查，检测过程复杂，需要大型的仪器， 同时，诊断的准确率仍然处于较低的水平，在我国的普及率相对较低。

肿瘤标志物是由肿瘤细胞合成并且分泌到体液中的活性物质，存在与组织 液、血液、唾液、尿液等体液中。1978年，在国立癌症研究所召开的“人类免 疫及肿瘤免疫诊断会议”上，由美国学者Herberman首次提出肿瘤标志物(Tumor marker，TM)这一概念。肿瘤标志物是指在恶性肿瘤发生及增殖过程中，由肿 瘤细胞自身的特殊性所表达并合成，最后分泌到细胞间及体液中的物质，或者， 病人由于对肿瘤出现各种不同的生理或病理反应，从而自身正常细胞分泌到组 织或体液中的物质，如某些蛋白质、小分子等等，统称为肿瘤标志物。使用肿 瘤标志物，可以实现对对肿瘤的检测，并在诊断过程中起到辅助作用。依据其 产生原理，肿瘤标志物分为两类，一类是由肿瘤自身分泌的；另一类是肿瘤与 机体相互作用产生的。按其产生原理，我们把能反映恶性演变各个阶段中表型 及基因型的特征或特性的物质，均称为肿瘤标志物。代谢组学是1999年英国 帝国理工大学JeremyNicholson教授提出的，定性定量的分析生物体内代谢小 分子物质的研究方法。对胃癌的代谢组学的研究，可以发现与胃癌有关的代谢 小分子物质。通过胃癌的标志性小分子代谢物，有利于胃癌的早发现，早治疗， 从而提高胃癌病人的生存质量。较早关于胃癌代谢组学的研究是2009年发表 于CancerRes的文章，而后又有多篇文章对胃癌的代谢组学进行阐述，通过对 胃癌的研究，科学家发现了很多胃癌所导致的产生差异调节(包括上调和下调) 的代谢小分子物质，例如：乳酸、苹果酸、尿酸、棕榈酸、丁酸、丙酸、嘧啶、 甘油、丝氨酸、谷氨酸、鸟氨酸、脯氨酸等。

液相色谱-质谱联用仪(liquidChromatographMassSpectrometer，缩写为 LC-MS)结合了液相色谱仪有效分离热不稳性及高沸点化合物的分离能力与质 谱仪很强的组分鉴定能力。液相色谱(LC)能够有效的将待测样品中的有机物 成分离开，而质谱(MS)能够对分开的有机物逐个的分析，得到有机物分子量 和浓度的信息，其原理为：使试样中各组分在离子源中发生电离，生成不同荷 质比的带电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在 质量分析器中，再利用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而 得到质谱图，从而确定其质荷比。尽管液相色谱-质谱法(简称液质联用)在肿 瘤代谢物检测中有所应用，但是迄今为止尚未见通过唾液以及高效液相色谱- 质谱构建的模型能够用于胃癌相关代谢小分子的检测。

发明内容