[发明专利]用于哺乳动物来源的神经胶质限制性祖细胞的扩增、鉴定、表征和效能增强的方法和组合物

权利要求书

1.一种用于减少GRP细胞群中可能不想要的细胞表型和/或降低GRP细胞群细胞中的标 准偏差的方法，所述方法包括：

(a)从能够产生A2B5阳性细胞的哺乳动物组织源中分离A2B5阳性细胞，以及

(b)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天。

2.权利要求1的方法，其还包括将收获的细胞冷冻和融化。

3.一种用于减少GRP细胞群中可能不想要的细胞表型和/或降低GRP细胞群细胞中的标 准偏差的方法，所述方法包括：

(a)将哺乳动物神经组织解离成细胞悬液；

(b)分离A2B5阳性细胞；

(c)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天；以及

(d)收获培养的细胞。

4.权利要求3的方法，其还包括将收获的细胞冷冻和融化。

5.一种用于减少GRP细胞群中可能不想要的细胞表型的方法，所述方法包括将GRP细胞 群冷冻和融化。

6.权利要求5的方法，其中将GRP细胞群在冷冻之前培养6DIV或小于6DIV。

7.权利要求5的方法，其还包括将融化的GRP细胞群另外体外培养的天数(DIV)为3天以 上。

8.权利要求6的方法，其还包括将融化的GRP细胞群另外体外培养的天数(DIV)为3天以 上。

9.一种用于制造A2B5阳性细胞缺失的哺乳动物神经细胞的方法，所述方法包括：

(a)从能够产生A2B5阳性细胞的哺乳动物组织源中分离A2B5阳性细胞；以及

(b)收集在去除A2B5阳性细胞后剩余的细胞。

10.权利要求9的方法，其中细胞在基质上体外培养的天数(DIV)为1天以上。

11.权利要求9的方法，其中细胞通过冷冻和融化细胞群来进一步缺失某些细胞类型。

12.权利要求9的方法，其中A2B5阳性细胞使用磁性活化细胞分选来分离。

13.权利要求12的方法，其中将细胞两次以上通过包含磁珠的柱，以分离A2B5阳性细 胞。

14.权利要求9的方法，其中A2B5阳性细胞使用荧光活化细胞分选或免疫淘选来分离。

15.权利要求14的方法，其中将细胞两次以上通过荧光活化细胞分选或免疫淘选皿。

16.一种用于表征GRP细胞的抗体组，所述抗体组包含针对A2B5、GFAP的抗体，和选自 Olig1、Olig2、O1、PDGFR-α、巢蛋白、NG2、PSA-NCAM、TuJ1、Ki-67和NeuN的一种或多种抗体。

17.一种用于将细胞鉴定或表征为GRP细胞的方法，所述方法包括用权利要求16的抗体 组对细胞群进行免疫表型分型，其中大多数细胞对A2B5，以及GFAP、巢蛋白、NG2、PDGFR-α、 Olig1、Olig2和O1中的一种或多种为阳性，并且大多数细胞对PSA-NCAM、TUJ1、PECAM、CD68 和NeuN中的一种或多种为阴性。

18.哺乳动物GRP细胞在制备药物中的应用，所述药物用于在患有与神经元脱髓鞘相关 的疾病、障碍、损伤或损坏的哺乳动物中增加神经元的髓鞘重新形成，其中所述哺乳动物 GRP细胞通过包含如下步骤的方法制造：

(a)仅仅通过选择A2B5阳性细胞从哺乳动物神经组织分离A2B5阳性细胞；

(b)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天；以及

(c)收获培养的细胞；

或者通过包含如下步骤的方法制造：

(a)将哺乳动物神经组织解离成细胞悬液；

(b)仅仅通过选择A2B5阳性细胞来分离A2B5阳性细胞；

(c)A2B5阳性细胞在基质上体外培养的天数(DIV)大于6天；以及

(d)收获培养的细胞。

19.哺乳动物GRP细胞在制备药物中的应用，所述药物用于在哺乳动物中治疗神经变性 疾病或障碍或神经系统或其一部分的损伤或损坏，其中所述哺乳动物GRP细胞通过权利要 求18中描述的方法制造。